tailieunhanh - Báo cáo " TẠO PHÔI BÒ BẰNG PHƯƠNG PHÁP VI TIÊM TINH TRÙNG VÀO BÀO TƯƠNG TRỨNG "

Để nâng cao hiệu quả thụ tinh nhằm nhân nhanh đ àn bò sữa, việc áp dụng vi tiêm (microinjection) tinh trùng vào bào tương tr ứng là cần thiết. Trứng bò thu nhận từ nhiều nguồn đ ược nuôi trưởng thành trong TCM 199 v ới 20% FBS (Fetal Bovine Serum). Tinh trùng bò s ữa đông lạnh được hoạt hoá bằng ph ương pháp swim-up trong môi trường BO. Sau khi vi ti êm, trứng được hoạt hoá | Phần IV CÔNG NGHỆ SINH HỌC ĐỘNG VẬT 337 TẠO PHÔI B Ò BẰNG PHƯƠNG PHÁP VI TIÊM TINH TRÙNG VÀO BÀO TƯƠNG TR ỨNG Trần Thị Thanh Khương Đặng Hoàng Lâm Phạm Văn Phúc Phan Kim Ngọc ĐH Khoa học Tự nhiên TPHCM MỞ ĐẦU Để nâng cao hiệu quả thụ tinh nhằm nhân nhanh đ àn bò sữa việc áp dụng vi tiêm microinjection tinh trùng vào bào tương trứng l à cần thiết. Trứng b ò thu nhận từ nhiều nguồn được nuôi trưởng thành trong TCM 199 v ới 20 FBS Fetal Bovine Serum . Tinh trùng bò s ữa đông lạnh được hoạt hoá bằng phương pháp swim-up trong môi trường BO. Sau khi vi ti êm trứng được hoạt hoá. Sau 9 lần thực hiện với 44 trứng tạo được 20 phôi với tỷ lệ thành công là 47 17 và phôi đạt giai đoạn morula l à 10 . ICSI - Intracytoplasmic sperm injection là phương pháp vi tiêm m ột tinh trùng được lựa chọn từ trước đó vào bào tương trứng với sự hỗ trợ của hệ thống vi thao tác cùng với kính hiển vi đảo ngược. Kỹ thuật n ày ra đời vào năm 1992 do Palemo và cs đ ã ứng dụng thành công trên người. ICSI như là một cuộc cách mạng trong hỗ trợ sinh sản đặc biệt trong chữa trị vô sinh nam. Đối với gia súc sau khi thực hiện ICSI tế b ào trứng có chứa tinh tr ùng phải trải qua quá trình hoạt hoá với các tác nhân như xung điện ethanol 7 Calcium Ionophore A23187 . Tạo phôi bò bằng phương pháp vi tiêm đã mở ra hướng mới trong nhân giống bò đem lại hiệu quả cao đặc biệt l à bò sữa trong trường hợp nguồn giao tử có chất lượng kém hoặc nguồn trứng đông lạnh. B ên cạnh đó việc tiếp cận kỹ thuật hiện đại còn giúp hoàn thi ện các quy tr ình công ngh ệ khác trong các nghi ên cứu xa như tạo dòng sinh thi ết tạo động vật chuyển gen bảo tồn động vật quý hiếm. VẬT LIỆU VÀ PHƯƠNG PHÁP Chuẩn bị trứng Trứng bò tươi thu nhận tại lò mổ hay trứng đông lạnh được lựa chọn phân loại A B. Các trứng này được nuôi trưởng thành trong môi trường TCM 199 Sigma với 20 FBS In vitrogen . Sau 24 giờ nuôi tiến h ành phá lớp tế bào cumulus bao quanh trứng bằng enzyme hyaluronidase 1mg ml Sigma . 338 Hội nghị KHOA HỌC VÀ CÔNG NGHỆ 2007 .