tailieunhanh - Báo cáo khoa học: Thu nhận khuôn nền ngoại bào từ nguyên bào sợi in vitro

Khuôn nền ngoại bào (Extracellular matrix – ECM) đã được chứng minh có khả năng tăng cường sự bám dính, tăng sinh của tế bào cũng như tạo ổ tế gốc invitro. Chúng tôi đã tiến hành thu nhận ECM của nguyên bào sợi người nhằm phục vụ cho nhiều nghiên cứu, trong đó có kỹ nghệ mô. Nguyên bào sợi từ da quy đầu người được nuôi cấy trong môi trường DMEM/F12 có bổ sung 10% FBS. Sau lần cấy chuyền thứ 3, các nguyên bào sợi được nhận diện bằng phương pháp nhuộm Trichrome và Vimentin. Sau. | TẠP CHÍ PHÁT TRIỂN KH CN TẬP 12 SÓ 09 - 2009 THU NHẬN KHUÔN NỀN NGOẠI BÀO TỪ NGUYÊN BÀO SỢI IN VITRO Nguyễn Thị Thanh Giang Tô Minh Quân Phan Kim Ngọc Trần Lê Bảo Hà Trường Đại học Khoa học Tự nhiên ĐHQG-HCM Bài nhận ngày 08 tháng 01 năm 2009 hoàn chỉnh sửa chữa ngày 24 tháng 07 năm 2009 TÓM TĂT Khuôn nền ngoại bào Extracellular matrix - ECM đã được chứng minh có khả năng tăng cường sự bám dính tăng sinh của tế bào cũng như tạo ổ tế gốc invitro. Chúng tôi đã tiến hành thu nhận ECM của nguyên bào sợi người nhằm phục vụ cho nhiều nghiên cứu trong đó có kỹ nghệ mô. Nguyên bào sợi từ da quy đầu người được nuôi cấy trong môi trường DMEM F12 có bổ sung 10 FBS. Sau lần cấy chuyền thứ 3 các nguyên bào sợi được nhận diện bằng phương pháp nhuộm Trichrome và Vimentin. Sau đó các nguyên bào sợi này được kích thích sản xuất ECM trong môi trường có bổ sung acid ascorbic 0 05 . Các thành phần tế bào được loại bỏ bằng Triton X-100 NH4Cl DNAse. Sự hiện diện của protein nền được xác định bằng phương pháp nhuộm PAS. Kết quả trong thành phần ngoại bào của nguyên bào sợi có collagen. Từ khóa Khuôn nền ngoại bào nguyên bào sợi tế bào gốc giàn giáo kỹ nghệ mô THIỆU Khuôn nền ngoại bào Extracellular matrix - ECM là hỗn hợp các đại phân tử polysaccharide glycoprotein do tế bào tiết ra bao xung quanh tế bào 7 . ECM có vai trò quan trọng trong tạo hình cũng như trong duy trì cấu trúc và chức năng tế bào mô cơ quan. ECM tăng cường khả năng bám dính tăng sinh biệt hóa tế bào cũng như tạo ổ tế bào gốc in vitro 3 8 10 . Ngoài ra ECM là một giàn giáo scaffold sinh học lý tưởng cho việc tái tạo mô và cơ quan 6 11 . Việc tạo ra các mô cơ quan nhân tạo có cấu trúc ba chiều thì nhất thiết phải có một giàn giáo có cấu trúc ba chiều. ECM đáp ứng được yêu cầu trên. Trên thế giới có rất nhiều công trình nghiên cứu về khuôn nền ngoại bào. Tuy nhiên ở Việt Nam đây là nghiên cứu tương đối mới chưa từng được tiến hành. Vì thế nghiên cứu được tiến hành dựa trên nhiều công trình nghiên cứu của thế giới