tailieunhanh - Thí nghiệm Sinh học phân tử - Bài 1

CÁC THIẾT BỊ CƠ BẢN CỦA MỘT PH BÀO THỰC VẬT a. Phòng rửa và cất nước - Máy cất nước 1 lần - Máy cất nước 2 lần b. Phòng hấp – sấy - Autoclave - Tủ sấy 60 – 200oC c. Phòng chuẩn bị môi trường - Cân phân tích (chính xác đến 0,0001 g) | Thí nghiệm Sinh học phân tử B MC THIẾT BỊ CƠ BẢN CỦA MOT PH BÀO THỰC VÂT a. Phòng rửa và cất nước - Máy cất nước 1 lần - Máy cất nước 2 lần b. Phòng hấp - sấy - Autoclave - Tủ sấy 60 - 200oC c. Phòng chuẩn bị môi trường - Cân phân tích chính xác đến 0 0001 g - Cân kỹ thuật chính xác đến 0 01 g - pH kế - Máy khuấy từ - Tủ lạnh - Lò vi sóng microwave d Phòng thao tác nuôi cấy - Tủ cấy vô trùng laminar - Quạt thông gió Ai 1 1 A Thí nghiệm Sinh học phân tử NHÂN TỐ ĐẢM BẢO THÀNH C VẬT Có 3 nhân tố chính - Bảo đảm điều kiện vô trùng - Chọn đúng môi trường và chuẩn bị môi tr - Chọn mô cấy và xử lý mô cấy thích hợp tr . Ý nghĩa của vô trùng trong nuôi cấy Môi trường để nuôi cấy mô và tế bào thực v thích hợp cho các loại nấm và vi khuẩn phát tr lớn hơn rất nhiều so với tế bào thực vật nếu tr tử nấm hoặc vi khuẩn thì chỉ sau vài ngày đến một tuần toàn bộ bề mặt r nhiều loại nấm và vi khuẩn. Thí nghiệm phải l không phát triển và chết dần. Nguồn tạp nhiễm Có 3 nguồn tạp nhiễm chính - Dụng cụ thuỷ tinh môi trường nuôi cấy ví trùng tuyệt đối - Trên bề mặt hoặc bên trong mô cấy tồn tại hoặc vi khuẩn - Trong quá trình thao tác làm rơi nấm hoặc mặt môi trường IIoi trỉinn Thí nghiệm Sinh học phân tử b. Nút đậy Thường dùng nhất là các nút đậy làm bằng chặt để đảm bảo bụi không đi qua được đồng dễ dàng trong quá trình nuôi cấy. Bông không các nhược điểm sau - Nếu khi hấp nút bông bị ướt hoặc dính me là với những thí nghiệm tiến hành trong một tl - Thao tác làm nút bông chậm không thuận mô lớn - Chỉ dùng được vài lần là phải bỏ Hiện nay người ta sử dụng nhiều loại nắp đi dụng cụ nuôi cấy mô cung cấp loại nắp ống ng thể hấp vô trùng ở nhiệt độ 121oC mà không b ống nghiệm bằng inox hoặc cao su rất thuận tiện cho việc vô nhôm để làm nắp đậy. c. Môi trường Môi trường nuôi cấy thường được hấp khử áp suất hơi nước bão hòa. Thời gian hấp từ 15 kPa 1atm tương đương với nhiệt độ 121oC. môi trường đều bị tiêu diệt kể cả ở dạng bào t nghiệm hoặc nút bông để tránh bị nhiễm trở .