tailieunhanh - Một số vấn đề về di truyền học (kỹ thuật phân tích protein)

Chuẩn bị dịch chiết tế bào để tinh sạch protein Việc phân lập và tinh sạch được các loại protein riêng rẽ có ý nghĩa quyết định đến khả năng tìm hiểu được chức năng của chúng. Mặc dù trong một số trường hợp, chúng ta có thể nghiên cứu chức năng của protein ở dạng hỗn hợp phức tạp, nhưng phần lớn những nghiên cứu này thường dẫn đến những kết luận “mù mờ”. | Một số vấn đề về di truyền học kỹ thuật phân tích protein V. 1 Các kỹ thuật phân tích protein . Chuẩn bị dịch chiết tế bào để tinh sạch protein Việc phân lập và tinh sạch được các loại protein riêng rẽ có ý nghĩa quyết định đến khả năng tìm hiểu được chức năng của chúng. Mặc dù trong một số trường hợp chúng ta có thể nghiên cứu chức năng của protein ở dạng hỗn hợp phức tạp nhưng phần lớn những nghiên cứu này thường dẫn đến những kết luận mù mờ . Chẳng hạn như khi chúng ta nghiên cứu về hoạt tính của một enzym ADN polymerase trong một hỗn hợp protein thô chẳng hạn từ dịch phân giải tế bào các enzym ADN polymerase và protein thành phần khác cũng có the ảnh hưởng đến hiệu suất tổng hợp ADN quan sát được trong thực nghiệm. Vì vậy việc tinh sạch các protein là một bước quan trong trong quá trình tìm hiểu về chức năng của chúng. Mỗi một protein thường có một số đặc tính riêng làm việc tinh sạch chúng thường có tính đặc thù. Điều này thì trái ngược với ADN vốn cơ bản giống nhau về cấu trúc và thành phần chỉ khác nhau về trình tự của các nucleotit. Các bước tinh sạch từng loại protein thường dựa trên các đặc tính đặc thù của nó về kích thước hình dạng điện tích và nhiều khi là chức năng của chúng. Vật liệu khởi đầu cho hầu hết các quá trình tinh sạch protein từ sinh vật là các dịch chiết tế bào. Không giống ADN vốn có tính phục hồi cao trong các điều kiện nhiệt độ sống khác nhau thì protein rất dễ bị biến tính và phá hủy sau khi bị giải phóng ra khỏi tế bào. Vì lý do này hầu hết quá trình chuẩn bị các dịch chiết và tinh sạch protein được tiến hành ở nhiệt độ lạnh 4oC . Có một số cách chuẩn bị dịch chiết tế bào. Các tế bào có thể phân giải bằng sử dụng chất tẩy các lực làm vỡ thành tế bào xử lý với .