tailieunhanh - Khảo sát một số yếu tố ảnh hưởng đến hiệu quả chuyển gen chi42 vào cây lạc (Arachis hypogaea L.) qua trung gian Agrobacterium tumefaciens

Trong nghiên cứu này, lá mầm chứa phôi của cây lạc được sử dụng làm mẫu vật chuyển gen từ chủng vi khuẩn A. tumefaciens LBA4404 mang vector pMVY719/chi42. Sự tích hợp gen chuyển vào bộ gen cây lạc được đánh giá bằng PCR. | TẠP CHÍ KHOA HỌC VÀ CÔNG NGHỆ Trường Đại học Khoa học ĐH Huế Tập 22 Số 2 2023 KHẢO SÁT MỘT SỐ YẾU TỐ ẢNH HƯỞNG ĐẾN HIỆU QUẢ CHUYỂN GEN Chi42 VÀO CÂY LẠC Arachis hypogaea L. QUA TRUNG GIAN Agrobacterium tumefaciens Nguyễn Hoàng Tuệ1 Lục Hoàng Linh1 Lê Thị Hằng1 Huỳnh Thị Quỳnh Trang1 Nguyễn Xuân Huy2 Phùng Thị Bích Hòa1 3 1 Khoa Sinh học Trường Đại học Khoa học Đại học Huế 2 Ban Khoa học Công nghệ và Quan hệ Quốc tế Đại học Huế 3 Khoa Sinh học Trường Đại học Sư phạm Đại học Huế Email ptbhoa@ Ngày nhận bài 02 8 2022 ngày hoàn thành phản biện 29 8 2022 ngày duyệt đăng 4 4 2023 TÓM TẮT Trong nghiên cứu này lá mầm chứa phôi của cây lạc được sử dụng làm mẫu vật chuyển gen từ chủng vi khuẩn A. tumefaciens LBA4404 mang vector pMVY719 chi42. Sự tích hợp gen chuyển vào bộ gen cây lạc được đánh giá bằng PCR. Kết quả cho thấy các mẫu vật được tiền nuôi cấy 3 ngày có bổ sung acetosyringone ở nồng độ 200 µM và thời gian đồng nuôi cấy 3 ngày thích hợp cho sự biến nạp gen vào lá mầm chứa phôi của giống lạc L14. Mật độ vi khuẩn ở OD600 1 0 cho tỷ lệ tái sinh chồi cao nhất. Cefotaxime 250 mg L thích hợp cho việc loại bỏ Agrobacterium khỏi mô lá mầm và và kanamycin 100 mg L thích hợp cho việc sàng lọc mô chuyển gen. Kết quả này là tiền đề để hoàn thiện quy trình chuyển gen chi42 vào giống lạc L14 nhằm phục vụ cho các nghiên cứu tiếp theo. Từ khóa Agrobacterium tumefaciens Arachis hypogaea biến nạp gen gen chi42 Trichiderma asperellum. 1. MỞ ĐẦU Lạc Arachis hypogaea L. là loại cây trồng kinh tế lấy dầu và thức ăn chăn nuôi quan trọng trên thế giới 1 2 . Việc trồng lạc mặc dù mang lại nguồn thu lớn cho nông dân nhưng cũng gặp không ít khó khăn do các loại nấm bệnh gây ra. Trong những năm gần đây bệnh héo rũ gốc mốc trắng do nấm Sclerotium rolfsii đã trở thành một mối đe dọa lớn đối với sản xuất lạc đây là một loại bệnh lây truyền qua đất có sức tàn phá mạnh ở các vùng trồng lạc trên khắp thế giới. S. rolfsii chủ yếu gây hại phần gốc thân của cây lạc làm cho toàn bộ cây bị