tailieunhanh - Xây dựng quy trình chuyển gen vào giống lúa TBR225 thông qua vi khuẩn Agrobaterium tumefaciens

Bài viết Xây dựng quy trình chuyển gen vào giống lúa TBR225 thông qua vi khuẩn Agrobaterium tumefaciens trình bày xây dựng quy trình chuyển gen thông qua vi khuẩn A. tumefaciens làm tiền đề ứng dụng công nghệ chỉnh sửa hệ gen trong chọn tạo giống lúa TBR225 trong tương lai. | KHOA HỌC CÔNG NGHỆ XÂY DỰNG QUY TRÌNH CHUYỂN GEN VÀO GIỐNG LÚA TBR225 THÔNG QUA VI KHUẨN Agrobaterium tumefaciens Phạm Thu Hằng1 Trần Lan Đài2 Nguyễn Văn Cửu1 Phạm Thị Vân1 Đỗ Thị Hạnh3 Phạm Xuân Hội1 Nguyễn Duy Phương1 TÓM TẮT Lúa TBR225 là một trong những giống lúa chủ lực được trồng rất phổ biến ở các tỉnh miền Bắc Việt Nam. Tuy nhiên giống lúa này vẫn có những nhược điểm nhất định như mẫn cảm với bệnh bạc lá cần được cải tiến. Ngày nay có rất nhiều phương pháp để cải tiến tính trạng của cây trồng trong đó có công nghệ chỉnh sửa gen CRISPR Cas9. Yếu tố quan trọng nhất quyết định sự thành công trong ứng dụng công nghệ CRISPR Cas9 là hoàn thiện quy trình nuôi cấy in vitro và chuyển gen cho đối tượng cây trồng quan tâm. Trong nghiên cứu này đã xây dựng thành công quy trình chuyển gen vào giống lúa TBR225 thông qua vi khuẩn Agrobacterium tumefaciens. Quy trình nuôi cấy in vitro tối ưu cho giống lúa TBR225 có tỷ lệ tạo mô sẹo đạt 84 25 tỷ lệ tái sinh chồi đạt 92 và 5 2 chồi cụm chồi. Quy trình chuyển gen lúa TBR225 tối ưu sử dụng mật độ vi khuẩn A. tumefaciens có giá trị OD600nm 0 05 cho bước đồng nuôi cấy và chất kháng sinh Hygromycin 30 mg L cho bước chọn lọc môi trường tạo mô sẹo MS3 môi trường MS bổ sung 2 5-D với nồng độ 2 5 mg L môi trường tái sinh TS1 môi trường MS bổ sung NAA 1 mg L kinetin 2 mg L BAP 0 5 mg L khi được thử nghiệm chuyển gen GFP tỉ lệ tạo mô sẹo và tái sinh chồi lần lượt là 84 25 và 92 hiệu suất chuyển gen đạt 21 7 . Kết quả nghiên cứu này là tiền đề cho các nghiên cứu cải tiến tính trạng của giống lúa TBR225 bằng công nghệ gen trong tương lai. Từ khóa Agrobacterium tumefaciens chuyển gen quy trình lúa giống TBR225. 1. ĐẶT VẤN ĐỀ 9 pháp chuyển gen thông qua A. tumefaciens đối với các giống lúa indica. Lúa là đối tượng cây trồng được quan tâm nghiên cứu từ rất sớm và hướng nghiên cứu chuyển TBR225 là một trong những giống lúa chủ lực có gen vào lúa đã có những thành công quan trọng từ diện tích canh tác chiếm tỉ trọng lớn trong sản xuất cuối .