tailieunhanh - Bước đầu xây dựng quy trình multiplex PCR phát hiện thịt heo và thịt bò trong thực phẩm dựa trên gen Cytochrome - B

Kỹ thuật PCR ngày càng được sử dụng phổ biến trong những nghiên cứu về phát hiện các loại mô động vật bằng phản ứng khuếch đại những trình tự DNA mong muốn. Ứng dụng phương pháp PCR, bước đầu chúng tôi đã nghiên cứu xây dựng thành công quy trình phân biệt thịt heo và thịt bò bằng kỹ thuật multiplex PCR (m-PCR) dựa trên sự khuếch đại gen Cytochrome - B bằng các cặp mồi đặc hiệu. | Kỷ yếu hội thảo khoa học Phân ban công nghệ thực phẩm BƯỚC ĐẦU XÂY DỰNG QUY TRÌNH MULTIPLEX PCR PHÁT HIỆN THỊT HEO VÀ THỊT BÒ TRONG THỰC PHẨM DỰA TRÊN GEN CYTOCHROME - B Nguyễn Thị Kim Oanh1 Lê Khánh Linh1 Nguyễn Thị Phương Thảo1 Nguyễn Thị Nết1 1 Khoa Công nghệ thực phẩm Trường Đại học Công nghiệp thực phẩm Thành phố Hồ Chí Minh Email netnguyen1120@ Ngày nhận bài 15 6 2017 Ngày chấp nhận đăng 2 7 2017 TÓM TẮT Kỹ thuật PCR ngày càng được sử dụng phổ biến trong những nghiên cứu về phát hiện các loại mô động vật bằng phản ứng khuếch đại những trình tự DNA mong muốn. Ứng dụng phương pháp PCR bước đầu chúng tôi đã nghiên cứu xây dựng thành công quy trình phân biệt thịt heo và thịt bò bằng kỹ thuật multiplex PCR m-PCR dựa trên sự khuếch đại gen Cytochrome - B bằng các cặp mồi đặc hiệu. Các thông số tối ưu cho quy trình gồm nhiệt độ bắt cặp giữa các cặp mồi và DNA khuôn trong quy trình khuếch đại DNA để phân biệt thịt heo và thịt bò bằng m- PCR là 59ºC nồ ng đô ̣ tối ưu của từng cặp mồ i là 0 4µM và độ nhạy của phương pháp là 0 1ng µl. Chúng tôi đã ứng dụng quy trình m-PCRtrên 12 mẫu đồ hộp thịt bò được dán nhãn không có thịt heo. Kết quả qúa trình khảo sát ghi nhận có 4 mẫu đồ hộp có thành phần thịt heo 33 33 8 mẫu còn lại không có thành phần thịt heo 66 67 . Vì vậy quy trình này có đủ cơ sở khoa học để triển khai trên một số loại thực phẩm được chế biến từ thịt bò khác với lượng mẫu lớn hơn. Từ khóa multiplex PCR phát hiện thịt heo thịt bò Cytochrome - B. 1. GIỚI THIỆU Xác định loài của các động vật trong các sản phẩm thịt là một vấn đề quan trọng trong việc bảo vệ người tiêu dùng khỏi sự pha trộn bất hợp pháp hoặc không mong muốn vì những lý do kinh tế tôn giáo và y tế 1 . Vì thế việc phát triển và ứng dụng các phương pháp phát hiện nhanh và chính xác các loại thịt trong sản phẩm chế biến từ thịt gia súc gia cầm là cần thiết 2 . Sản phẩm thịt chế biến thường có nguồn gốc từ một hay nhiều loại thịt khác nhau. Do sự đa dạng về hình thức chất lượng và giá .