tailieunhanh - Xây dựng qui trình khuếch đại axit nucleic đẳng nhiệt Recombinase Polymerase Amplification (RPA) phát hiện nhanh gen hly của vi khuẩn Listeria monocytogenes

Bài viết này xây dựng qui trình RPA nhằm phát hiện nhanh vật liệu di truyền của vi khuẩn L. monocytogenes với mong muốn góp phần vào xây dựng công cụ kiểm soát và ngăn chặn nguy cơ bùng phát ngộ độc thực phẩm trên diện rộng ở Việt Nam. Mời các bạn cùng tham khảo! | 12 Tạp chí Khoa học amp Công nghệ Số 12 Xây dựng qui trình khuếch đại axit nucleic đẳng nhiệt Recombinase Polymerase Amplification RPA phát hiện nhanh gen hly của vi khuẩn Listeria monocytogenes Trần Thị Hậu Trần Hồng Diễm Phùng Thị Thu Hường Viện Kĩ thuật Công nghệ cao NTT Đại học Nguyễn Tất Thành tthau@ Tóm tắt Listeria monocytogenes là một trong những vi khuẩn gây ngộ độc thực phẩm phổ biến có khả Nhận năng dẫn đến tử vong cho người nhiễm khuẩn. L. monocytogenes thường được phát hiện bằng Được duyệt kĩ thuật vi sinh truyền thống hoặc phương pháp sinh học phân tử phổ biến như Polymerase Công bố Chain Reaction PCR . Tuy nhiên khả năng ứng dụng phát hiện L. monocytogenes của các kĩ thuật này bị hạn chế do sự tốn kém về thời gian thực hiện và các yêu cầu nghiêm ngặt về thiết bị cũng như kĩ thuật viên có kinh nghiệm. Nghiên cứu này đã xây dựng phương pháp khuếch đại Từ khóa axit nucleic đẳng nhiệt Recombinase Polymerase Amplification RPA để phát hiện nhanh và gen hly chính xác gen hly của vi khuẩn L. monocytogenes. Kết quả nghiên cứu cho thấy trình tự mồi khuếch đại đẳng nhiệt thiết kế cho phản ứng RPA đã nhân bản thành công gen hly của vi khuẩn L. monocytogenes. Listeria monocytogenes Phản ứng RPA được thiết lập ở điều kiện nhiệt độ và thời gian tối ưu là 39 0C trong 25 phút. Polymerase Chain Giới hạn phát hiện tối thiểu của phản ứng RPA là 310 fg đối với DNA tách chiết nhạy gấp Reaction Recombinase 1000 lần so với phản ứng PCR truyền thống. Phương pháp RPA với ưu điểm nhanh nhạy có Polymerase tiềm năng thay thế các phương pháp phát hiện truyền thống và phát triển thành bộ kit ứng dụng Amplification. để phát hiện nhanh vi khuẩn L. monocytogenes. 2020 Journal of Science and Technology - NTTU 1 Đặt vấn đề do nhiễm L. Monocytogenes 3 . Hầu hết các trường hợp nhiễm khuẩn là trẻ sơ sinh phụ nữ có thai người già và Listeria monocytogenes thuộc nhóm các loại vi khuẩn đường người suy giảm hệ miễn dịch. Ngộ độc thực phẩm do L. ruột