tailieunhanh - Khác biệt trong sự mẫn cảm với Novirhabdo virus của Zebrafish dòng hoang dại và đột biến và vai trò của Lymphocytes

Để nghiên cứu sự đóng góp của miễn dịch sơ cấp và lymphocyte dựa trên miễn dịch kháng lại virus nhiễm trên cá, hai dòng zebrafish hoang dại (wild-type) và đột biến (Rag1 mutant, không có tế bào lymphocyte T và B) được cảm nhiễm với Snakehead Rhabdovirus (SHRV), thuộc novirhabdovirus, bằng cách tiêm xoang bụng (IP) vào cá ở các độ tuổi khác nhau và nhiệt độ khác nhau. | VIỆN NGHIÊN CỨU NUÔI TRỒNG THỦY SẢN II KHÁC BIỆT TRONG SỰ MẪN CẢM VỚI NOVIRHABDO VIRUS CỦA ZEBRAFISH DÒNG HOANG DẠI VÀ ĐỘT BIẾN VÀ VAI TRÒ CỦA LYMPHOCYTES Nguyễn Ngọc Du1 Lorelei Ford2 Lora Petri- Hanson2 Larry Hanson2 TÓM TẮT Để nghiên cứu sự đóng góp của miễn dịch sơ cấp và lymphocyte dựa trên miễn dịch kháng lại virus nhiễm trên cá hai dòng zebrafish hoang dại wild-type và đột biến Rag1 mutant không có tế bào lymphocyte T và B được cảm nhiễm với Snakehead Rhabdovirus SHRV thuộc novirhabdovirus bằng cách tiêm xoang bụng IP vào cá ở các độ tuổi khác nhau và nhiệt độ khác nhau. Cả hai dòng đều mẫn cảm cao với SHRV. Cá bệnh có biểu hiện lồi mắt xuất huyết gốc vây và thân vảy dựng. Dòng hoang dại có sự mẫn cảm với virus giảm dần theo độ tuổi. Cá ở 2 tháng tuổi chết nhiều hơn cá 4 và 7 tháng tuổi khi cho cảm nhiễm với virus. Nhiệt độ cũng gây ảnh hưởng quan trọng trong sự mẫn cảm của chủng hoang dại. Ở 24 C tỷ lệ cá chết cao hơn ở 28 C. Trong nuôi cấy tế bào SHRV có đường cong tăng trường tương tự nhau ở 20 C 24 C và 28 C cho thấy sự tăng sinh của virus không bị ảnh hưởng ở nhiệt độ thấp. Ngược lại độ tuổi và nhiệt độ không cho thấy có sự ảnh hưởng ở chủng đột biến Rag1 mutant . Tỷ lệ chết cũng khác nhau giữa dòng hoang dại và đột biến. Dòng hoang dại bắt đầu chết từ ngày thứ 3 sau khi gây nhiễm và kéo dài đến ngày thứ 10 trong khi dòng đột biến tiếp tục chết trong vòng một tuần tiếp sau đó. Sự khác nhau trong đáp ứng miễn dịch của tế bào natural killer NK và tế bào T ở chủng đột biến và hoang dại được đánh giá thông qua mức biểu hiện của interferon gamma IFNγ gene từ mẫu thận trước bằng kỹ thuật quantitative reverse transcriptase PCR qRT PCR . Gene biểu hiện mức thấp ở lô đối chứng âm nhưng tăng mạnh ở cả hai dòng khi được cảm nhiễm với SHRV. IFNγ tăng 400 lần và 100 lần ở Rag1 mutant tại nhiệt độ 24 C và 28 C tăng 40 lần và 80 lần ở dòng hoang dại tại nhiệt độ 24 C và 28 C. Sự gia tăng mạnh mẽ của IFNγ trong dòng đột biến khuyết lymphocyte chứng tỏ có sự hoạt động