tailieunhanh - Nghiên cứu ứng dụng kỹ thuật miễn dịch huỳnh quang và phân tích hình ảnh nội hàm cao trong đánh giá hoạt tính ức chế chuyển vị yếu tố nhân NF-κB

Bài viết trình bày ứng dụng kỹ thuật miễn dịch huỳnh quang kết hợp phân tích hình ảnh nội hàm cao để phát hiện và định lượng sự chuyển vị của tiểu đơn vị NF-κB p65 liên kết protein huỳnh quang xanh (green fluorescent protein, GFP) kích hoạt bởi cytokine trên dòng tế bào ung thư cổ tử cung HeLa. | Nghiên cứu ứng dụng kỹ thuật miễn dịch huỳnh quang và phân tích hình ảnh nội hàm cao trong đánh giá hoạt tính ức chế chuyển vị yếu tố nhân NF-κB Tạp chí Công nghệ Sinh học 18 1 157-165 2020 NGHIÊN CỨU ỨNG DỤNG KỸ THUẬT MIỄN DỊCH HUỲNH QUANG VÀ PHÂN TÍCH HÌNH ẢNH NỘI HÀM CAO TRONG ĐÁNH GIÁ HOẠT TÍNH ỨC CHẾ CHUYỂN VỊ YẾU TỐ NHÂN NF-κB Đỗ Hữu Nghị1 2 Nguyễn Xuân Vũ3 Nguyễn Xuân Thành4 Lưu Văn Chính1 2 Lê Mai Hương1 2 1 Viện Hóa học các hợp chất thiên nhiên Viện Hàn lâm Khoa học và Công nghệ Việt Nam 2 Học viện Khoa học và Công nghệ Viện Hàn lâm Khoa học và Công nghệ Việt Nam 3 Trường Đại học Nông Lâm Thái Nguyên Đại học Thái Nguyên 4 Chi cục Quản lý Chất lượng Nông Lâm Thủy sản Thái Nguyên Người chịu trách nhiệm liên lạc. E-mail nghi@ Ngày nhận bài Ngày nhận đăng TÓM TẮT Yếu tố nhân kappa B hay NF-κB là yếu tố phiên mã thiết yếu kiểm soát quá trình biểu hiện gen mã hóa của các cytokine tiền viêm trong quá trình sinh lý bệnh viêm và ung thư. Trong nghiên cứu này trình bày ứng dụng kỹ thuật miễn dịch huỳnh quang kết hợp phân tích hình ảnh nội hàm cao để phát hiện và định lượng sự chuyển vị của tiểu đơn vị NF-κB p65 liên kết protein huỳnh quang xanh green fluorescent protein GFP kích hoạt bởi cytokine trên dòng tế bào ung thư cổ tử cung HeLa. Sau khi nghiên cứu các điều kiện thích hợp hình ảnh thu được đủ chất lượng phân tích và đảm bảo độ tin cậy của phép thử khi hệ số Z tính theo tỷ lệ protein trong nhân Nu và tế bào chất Cyto được xác định lần lượt là 0 70 đối với Nuc-Cyto và 0 73 cho Nuc Cyto. Cụ thể thử nghiệm với mẫu hợp chất zerumbone SHTN-4 nồng độ 25 µg mL có thể hiện hoạt tính ức chế NF-κB qua xác định lượng p65-GFP trong bào tương cao hơn đáng kể 82 so với đối chứng 19 4 khi xử lý tế bào HeLa với chất cảm ứng IL-1 10 ng mL trong 1 giờ. Kết quả nghiên cứu là cơ sở để xây dựng quy trình định lượng protein nội bào trong sàng lọc các hoạt chất trên đích phân tử sinh học liên quan hoạt tính kháng viêm và ung thư ở điều kiện nghiên