tailieunhanh - Dung hợp protoplast và lai vô tính tế bào thực vật

Các phương pháp lai tế bào thực vật dung hợp tế bào trần được ứng dụng trong tạo giống thực vật. Hiện nay có các phương pháp dung hợp tế bào trần như sau : 1. Xử lý bằng NaNO3 Năm 1970, Power và cs. Đã dung NaNO3 (0,25 M) kích thích dung hợp hai protoplast. Carlson và cs. (1972) cũng dung phương pháp này để sản xuất cây lai đầu tiên (Nicotiana glance × N.(langsdorffii). | Dung hợp protoplast và lai vô tính tế bào thực vật Các phương pháp lai tế bào thực vật -dung hợp tế bào trần được ứng dụng trong tạo giống thực vật. Hiện nay có các phương pháp dung hợp tế bào trần như sau 1. Xử lý bằng NaNO3 Năm 1970 Power và cs. Đã dung NaNO3 0 25 M kích thích dung hợp hai protoplast. Carlson và cs. 1972 cũng dung phương pháp này để sản xuất cây lai đầu tiên Nicotiana glance X N. langsdorffii . Tuy nhiên phương pháp này cho hiệu suất thấp vì NaNO3 không thích hợp với tế bào bị không bào hoá mạnh như protoplast từ nhu mô lá. 2. Xử lý bằng PEG Tác nhân kích thích dung hợp là PEG polyethylene glycol . Nồng độ và trọng lượng phân tử của PEG quyết định sự thành công của thí nghiệm dung hợp. PEG có trọng lượng phân tử thấp 100 không thể tạo ra một sự dính chặt chắc chắn trong khi PEG trọng lượng phân tử 6000 cho hiệu quả dung hợp cao hơn. Xử lý PEG cùng với pH Ca2 có hiệu quả tăng tần số dung hợp và khả năng sống sót của protoplast. PEG có hai tác dụng hoặc cung cấp cầu nối để Ca2 có thể liên kết các bề mặt màng với nhau hoặc dẫn đến sự rối loạn điện tích bề mặt màng trong suốt quá trình rửa giải. 3. Dung hợp bằng điện Phương pháp này đơn giản hơn nhanh hơn và hiệu quả hơn dung hợp bằng hóa chất. Điều quan trọng hơn cả là dung hợp bằng điện không gây độc đối với tế bào như thường tìm thấy ở các protoplast hoặc các the dị nhân được xử lý bằng PEG. Senda và cs. 1979 là những người đầu tiên nghiên cứu theo hướng dung hợp bằng điện ở Rauwolfia. Sau đó Zimmermann và Scheurich 1981 cũng đã chứng minh rằng các protoplast có thể dung hợp bằng điện trường và đưa ra một protocol có thể sử dụng rộng rãi. Quá trình dung hợp bao gồm hai bước .