tailieunhanh - Xây dựng quy trình phát hiện nhanh ngô chứa gen Cry1Ab dựa trên kỹ thuật LAMP

Trong nghiên cứu này, quy trình phát hiện ngô biến đổi gen bằng kỹ thuật LAMP đã được xây dựng thành công thông qua khảo sát các yếu tố ảnh hưởng tới phản ứng. | Xây dựng quy trình phát hiện nhanh ngô chứa gen Cry1Ab dựa trên kỹ thuật LAMP Tạp chí Khoa học Công nghệ và Thực phẩm 20 1 2020 37-45 XÂY DỰNG QUY TRÌNH PHÁT HIỆN NHANH NGÔ CHỨA GEN Cry1Ab DỰA TRÊN KỸ THUẬT LAMP Hồ Viết Thế1 Trần Thị Mỹ Hạnh2 Nguyễn Thị An1 Ngô Thị Kim Anh1 Nguyễn Thị Hương1 Lê Ngọc Giàu1 1 Trường Đại học Công nghiệp Thực phẩm TP. Hồ Chí Minh 2 Trường Đại học Công nghệ TP. Hồ Chí Minh HUTECH Email thehv@ Ngày nhận bài 26 11 2019 Ngày chấp nhận đăng 21 02 2020 TÓM TẮT Việt Nam đã cho phép trồng ngô biến đổi gen có chứa gen Cry1Ab để tăng khả năng kháng sâu đục thân. Tuy nhiên vẫn còn nhiều ý kiến tranh cãi về mức độ an toàn của loại cây trồng mới này vì vậy đã có nhiều phương pháp sử dụng để phát hiện sự hiện diện của gen Cry1Ab trong cây ngô. Các phương pháp hiện tại phần lớn đều phụ thuộc nhiều vào trang thiết bị phòng thí nghiệm và khó thực hiện ngoài thực địa. Gần đây kỹ thuật khuếch đại DNA đẳng nhiệt LAMP Loop Mediated Isothermal Amplification đã được sử dụng để phát hiện nhanh các đối tượng gây bệnh trên người và vật nuôi một cách nhanh chóng với độ chính xác cao và ít yêu cầu về trang thiết bị đắt tiền. Trong nghiên cứu này quy trình phát hiện ngô biến đổi gen bằng kỹ thuật LAMP đã được xây dựng thành công thông qua khảo sát các yếu tố ảnh hưởng tới phản ứng. Kết quả cho thấy nồng độ phù hợp của các mồi FIP BIP và F3 B3 là 0 4 µM với nhiệt độ phản ứng phù hợp ở 60 C. Ngoài ra qua khảo sát về ngưỡng phát hiện của phương pháp LAMP so với phương pháp Realtime PCR cũng cho thấy độ nhạy của phản ứng LAMP cao hơn phản ứng Realtime PCR. Ngoài ra khi sử dụng thuốc nhuộm HNB ở nồng độ 80 µM có thể phân biệt được giữa ngô không chuyển gen và ngô chứa gen Cry1Ab. Kết quả này là tiền đề để thiết kế KIT phát hiện ngô biến đổi gen ngoài thực địa. Từ khóa Biến đổi gen Cry1Ab LAMP ngô Realtime PCR. 1. MỞ ĐẦU Trên thế giới các cây lương thực như lúa ngô biến đổi gen hay các cây công nghiệp như đậu nành bông biến đổi gen được trồng phổ biến với .