tailieunhanh - Xác định gen Vip3A trong vi khuẩn Bacillus thuringiensis var. kurstaki bằng kỹ thuật sinh học phân tử và độc tính gây bệnh đối với côn trùng gây hại

Bài viết phân tích 10 mẫu là các mẫu khuẩn lạc vi khuẩn Bacillus thuringiensis đã được chọn lọc từ những mẫu được xác định có sự xuất hiện tinh thể độc và 1 mẫu đối chứng dương là Bacillus thuringiensis var. kurstaki do Boonhiang Promdonkoy (BIOTEC Thái Lan) cung cấp, các mẫu được thu thập từ các tỉnh Vĩnh Phúc, Bến Tre, Lâm Đồng và Tiền Giang. | Xác định gen Vip3A trong vi khuẩn Bacillus thuringiensis var. kurstaki bằng kỹ thuật sinh học phân tử và độc tính gây bệnh đối với côn trùng gây hại Kết quả nghiên cứu Khoa học BVTV - Số 4 2019 XÁC ĐỊNH GEN Vip3A TRONG VI KHUẨN Bacillus thuringiensis var. kurstaki BẰNG KỸ THUẬT SINH HỌC PHÂN TỬ VÀ ĐỘC TÍNH GÂY BỆNH ĐỐI VỚI CÔN TRÙNG GÂY HẠI Identification of Vip3A Gene Bacillus thuringiensis var. kurstaki on Polymerase Chain Reaction PCR and Toxicity on Harmful Insects 1 2 2 Dƣơng Kim Hà Trƣơng Phƣớc Thiên Hoàng Trần Thị Kim Oanh 2 2 Trần Thị Hồng Nhung và Lê Đình Đôn Ngày nhận bài Ngày chấp nhận Abstract Bacillus thuringiensis Bt is a positive Gram spore-forming bacterium that synthesizes parasporal crystalline inclusions that containing Cry and Cyt proteins some of which are toxic in against a wide range of insect orders nematodes and human-cancer cells These toxins have been successfully used as bioinsecticides against caterpillars beetles and flies including mosquitoes and blackflies. Bt also synthesizes insecticidal proteins during the vegetative growth phase which are subsequently secreted into the growth medium. These proteins are commonly known as vegetative insecticidal proteins Vips and hold insecticidal activity against lepidopteran coleopteran and some homopteran pests. Therefore it is important and necessary to isolate and indentify toxic gens especially is Vip gene. So we performed present of vip3A gen in Bacillus thuringiensis based on Vip3A primers. 10 type Bacillus thuringiensis strains isolated from different regions in Viet Nam were stained Gram test presence of spores and crystal. After that process SDS-PAGE with 5 in 10 type can create crystal and . As a result all of them have protein with 66 kDa. However we unassertive this is Vip3A protein. To be sure that is Vip3A protein conducted PCR with 10 type and 1 positive control. Size PCR product approximately kb and .