tailieunhanh - Phát hiện gen liên quan đến sự sinh độc tố cylindrospermopsin trong mẫu sinh khối vi khuẩn lam bằng kỹ thuật PCR

Nghiên cứu sử dụng các cặp mồi đặc hiệu M4 1F/M5 1R và M13 1F/M14 1R để khuếch đại các đoạn gen liên quan đến sự sinh tổng hợp độc tố cylindrospermopsin – CYN (PKS và PS) trong sinh khối vi khuẩn lam. Kỹ thuật PCR đã được sử dụng để phát hiện gen liên quan đến sự sinh độc tố này trong mẫu sinh khối cũng như sự xuất hiện các loài vi khuẩn lam tiềm năng sinh độc tố CYN trong các mẫu nở hoa vi khuẩn lam ngoài tự nhiên. | Phát hiện gen liên quan đến sự sinh độc tố cylindrospermopsin trong mẫu sinh khối vi khuẩn lam bằng kỹ thuật PCR Tạp chí Khoa học Đại học Huế: Khoa học Tự nhiên pISSN 1859–1388 Vol. 128, No. 1E, 15–26, 2019 eISSN 2615–9678 PHÁT HIỆN GEN LIÊN QUAN ĐẾN SỰ SINH ĐỘC TỐ CYLINDROSPERMOPSIN TRONG MẪU SINH KHỐI VI KHUẨN LAM BẰNG KỸ THUẬT PCR Detection of genes responsible for biosynthesis of cylindrospermopsin in cyanobacterial biomass by PCR method Nguyễn Thị Thu Liên1,2*, Hoàng Thị Thanh2, Lê Thị Tuyết Nhân1, Ngô Thị Diễm My1 1 Viện Công nghệ sinh học, Đại học Huế, Tỉnh lộ 10, Phú Thượng, Phú Vang, Thừa Thiên Huế, Việt Nam 2 Trường Đại học Khoa học, Đại học Huế, 77 Nguyễn Huệ Huế, Việt Nam * Tác giả liên hệ Nguyễn Thị Thu Liên (Thư điện tử: nthuliencnsh@) (Ngày nhận bài: 25–7–2019; Ngày chấp nhận đăng: 12–10–2019) Tóm tắt. Nghiên cứu sử dụng các cặp mồi đặc hiệu M4 1F/M5 1R và M13 1F/M14 1R để khuếch đại các đoạn gen liên quan đến sự sinh tổng hợp độc tố cylindrospermopsin – CYN (PKS và PS) trong sinh khối vi khuẩn lam. Kỹ thuật PCR đã được sử dụng để phát hiện gen liên quan đến sự sinh độc tố này trong mẫu sinh khối cũng như sự xuất hiện các loài vi khuẩn lam tiềm năng sinh độc tố CYN trong các mẫu nở hoa vi khuẩn lam ngoài tự nhiên. Thí nghiệm được thực hiện với 23 mẫu tại 23 điểm thuộc 9 tỉnh (thành) trong nước. Kết quả cho thấy các gen PKS và PS trong mẫu tự nhiên có thể được khuếch đại ở điều kiện: nồng độ DNA khuôn mẫu từ 140 đến 160 ng DNA/25 µL thể tích phản ứng; thời gian bắt mồi là 20 giây; nhiệt độ bắt mồi 55 °C. Trong số 23 mẫu nghiên cứu, gen PS được phát hiện trong 7 mẫu; gen PKS được phát hiện trong 5 mẫu, trong đó có 5 mẫu thuộc 5 địa điểm phát hiện cả hai gen PS và PKS. So sánh với kết quả phân tích sự xuất hiện của loài gây độc Cylindrospermopsis raciborskki và hàm lượng độc tố CYN trong nước cho thấy tiềm năng của việc sử dụng phương pháp PCR trong việc phát hiện các .