tailieunhanh - Thu nhận N-acetyl-Glucosamine từ chitin sử dụng enzyme endochitinase và β-hexosamindase tái tổ hợp

Chủng tái tổ hợp chứa gene mã hóa cho endochitinase từ Bacillus licheniformis DSM13 và chủng tái tổ hợp chứa gene mã hóa cho β-hexosaminidase từ Lactococus lactis IL1403 được sử dụng để nuôi cấy, thu nhận và tinh sạch enzyme tái tổ hợp. Endochitinase và β-hexosaminidase tái tổ hợp được xác định đặc tính bằng cách sử dụng cơ chất tương ứng là chitin huyền phù 2% và pNp-GlcNAc 10 mM. | Thu nhận N-acetyl-Glucosamine từ chitin sử dụng enzyme endochitinase và β-hexosamindase tái tổ hợp Tạp chí Khoa học Công nghệ Nông nghiệp Việt Nam - Số 8(81)/2017 THU NHẬN N-ACETYL-GLUCOSAMINE TỪ CHITIN SỬ DỤNG ENZYME ENDOCHITINASE VÀ β-HEXOSAMINDASE TÁI TỔ HỢP Nguyễn Hoàng Anh1, Nguyễn Văn Giang2, Lê Thanh Hà3 TÓM TẮT Chủng tái tổ hợp chứa gene mã hóa cho endochitinase từ Bacillus licheniformis DSM13 và chủng tái tổ hợp chứa gene mã hóa cho β-hexosaminidase từ Lactococus lactis IL1403 được sử dụng để nuôi cấy, thu nhận và tinh sạch enzyme tái tổ hợp. Endochitinase và β-hexosaminidase tái tổ hợp được xác định đặc tính bằng cách sử dụng cơ chất tương ứng là chitin huyền phù 2% và pNp-GlcNAc 10 mM. Kết quả chỉ ra rằng: Endochitinase rất bền nhiệt, với chu kì bán hủy (t50) ở 37 và 50oC là 15 và 7 ngày ủ tương ứng, β-hexosaminidase có chu kì bán hủy ở 30oC và 37oC là 35 và 17 giờ. Thêm vào đó, endochitinase và β-hexosaminidase đều bền ở pH 6. Sản phẩm chính thủy phân chitin huyền phù 2% sử dụng endochitinase ở 50oC và β-hexosaminidase ở 30oC tại pH6 là GlcNAC. Từ khóa: Chitin, chitinase, β-hexosaminidase, , N-acetyl-Glucosamine I. ĐẶT VẤN ĐỀ II. VẬT LIỆU VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU N-acetyl-β-D-glucosamine (GlcNAc) được biết . Vật liệu nghiên cứu đến là một hoạt chất sinh học quý, có tác dụng Chủng tái tổ hợp mang gene mã hóa cho chữa các loại bệnh về khớp, viêm ruột và đã được enzyme endochitinase từ Bacillus licheniformis ứng dụng để sản xuất thực phẩm chức năng, mỹ DSM13 và tái tổ hợp mang gene mã hóa cho phẩm (Lord, 1985). GlcNAc có thể được tổng hợp β-hexosaminidase từ Lactococus lactis ssp. lactis từ chitin, một polysacharide cấu tạo từ nhiều đơn phân GlcNAc liên kết với nhau bằng liên kết β (1-4) IL1403 được sử dụng để nuôi cấy, thu nhận enzyme glycoside. Chitin rất dồi dào trong tự nhiên, chỉ tái tổ hợp. đứng sau cellulose, dễ dàng tìm thấy trong vỏ của . .