tailieunhanh - Hợp chất hữu cơ - Phương pháp cô lập: Phần 2

Nối tiếp nội dung phần 1, phần 2 của tài liệu Hợp chất hữu cơ - Phương pháp cô lập sẽ tiếp tục cung cấp cho người đọc các kiến thức: Phương pháp sắc ký trao đổi ion, phương pháp sắc ký gel, phương pháp sắc ký khí,. . | CÁC PHƯƠNG PHÁP CÔ LẬP HỘP chất Hưu Cơ Chương 5 SẮC KÝ TRAO ĐỔI ION sắc ký trao đổi ion là một trong những phương pháp đê cô lập hợp chất hữu cơ. Kỹ thuật này được biết đến từ năm 1930 và đến năm 1940 mới có báo cáo cho biết sử dụng để cô lập và tách các amino acid từ dung dịch thủy giải protein. Cho đến nay kỹ thuật này vẫn còn được sử dụng rộng rãi để phân tích và cô lập các protein. Trong sắc ký trao đổi ion yếu tố chính liên quan đến việc lưu giữ và tách riêng các hợp chất dựa vào sự tương tác tĩnh điện electrostatic attraction giữa các hợp chất có mang điện tích hiện diện trong mẫu phân tích với các tâm có mang điện tích ngược dấu với điện tích của hợp chất của pha tĩnh. Trong việc cô lập các hợp chất tự nhiên với hỗn hợp mẫu chất ban đầu có chứa nhiều loại hợp chất khác nhau nếu trong số đó có loại hợp chất có mang điện tích sử dụng kỹ thuật sắc ký trao đổi ion để tách hợp chất đó ra khỏi hỗn hợp. o . Đối -ion cũa dung dịch đệm ban đầu Hai Ịoại hợp chất cần tách lon của dung dịch giải ly cột Hạt nhựa trao đổi ion Hình 1 Các giai đoạn trong quá trình trao đổi lon 283 CHƯƠNG 5 Giai đoạn ỉ Nhựa trao đổi ion đọng cân bằng với các đối- ion của nó. Các hợp chất cần phân tích sẵn sàng đi ngang qua nhựa. Giai đoạn 2 Nhựa trao đổi ion đang trao đổi với các hợp chất cần phân tích các đối-ìon của nhựa bị loại ra khỏi nhựa. Sau giai đoạn cân bằng này việc giải ỉy sẽ được thực hiện. Giai đoạn 3 lon của dung dịch giải ly đang tranh dành trao đổi vôi nhựa để đẩy tách hợp chất ra khỏi nhựa. Giai đoạn 4 Gia tăng nồng độ của dung dịch giải ly để ìon của dung dịch giải ly đủ mạnh để tranh dành trao đổi với nhựa để đẩy tách hợp chất ra khỏi nhựa Giai đoạn 5 Tái tạo nhựa trả lại tình trạng nhựa ban đầu. 1. CẤC KIẾN THỨC CẴN BẢN vế SẮC KÝ TRAO Đổl ION . Các đặc điểm tổng quát của nhựa trao đổi ion Nhựa trao đổi ion là những hạt hình cầu không tan trong nước trên bề mặt hạt nhựa mang những nhóm chức có mang điện tích dương hoặc âm các nhóm này được gọi là nhóm hoạt động của nhựa