tailieunhanh - Nghiên cứu tạo que thử phát hiện nhanh kháng nguyên F1 của vi khuẩn Yersinia pestis

Vi khuẩn Yersinia pestis là tác nhân gây bệnh dịch hạch, một trong những loại bệnh truyền nhiễm tối nguy hiểm và có thể được sử dụng làm vũ khí sinh học có tính hủy diệt cao. Mục tiêu của nghiên cứu này là nhằm xây dựng quy trình chế tạo que thử phát hiện nhanh kháng nguyên nang F1 đặc trưng của Y. pestis dựa trên kỹ thuật sắc ký miễn dịch kẹp đôi. | Nghiên cứu tạo que thử phát hiện nhanh kháng nguyên F1 của vi khuẩn Yersinia pestis Hóa học & Kỹ thuật môi trường NGHIÊN CỨU TẠO QUE THỬ PHÁT HIỆN NHANH KHÁNG NGUYÊN F1 CỦA VI KHUẨN YERSINIA PESTIS Mai Thị Thu1, Nguyễn Phượng Minh1*, Lê Trọng Tài1, Nguyễn Ngọc Hưng2 Phạm Tiến Dũng3, Lê Quang Hòa3* Tóm tắt: Vi khuẩn Yersinia pestis là tác nhân gây bệnh dịch hạch, một trong những loại bệnh truyền nhiễm tối nguy hiểm và có thể được sử dụng làm vũ khí sinh học có tính hủy diệt cao. Mục tiêu của nghiên cứu này là nhằm xây dựng quy trình chế tạo que thử phát hiện nhanh kháng nguyên nang F1 đặc trưng của Y. pestis dựa trên kỹ thuật sắc ký miễn dịch kẹp đôi. Để đạt được mục tiêu này, chúng tôi đã tiến hành khảo sát các thông số như loại và lượng kháng thể vạch thử nghiệm và kháng thể phát hiện cũng như loại đệm sử dụng khi chạy que thử. Các kết quả nghiên cứu đã chỉ ra rằng cấu hình tối ưu của que thử phát hiện kháng nguyên F1 là sử dụng kháng thể đơn dòng G20 tại vị trí vạch thử nghiệm, kháng thể đơn dòng 3YP8- YPF19 làm kháng thể phát hiện gắn nano vàng và đệm chạy que thử là đệm PBS pH 7,4 có bổ sung 0,5% BSA và 0,05% Tween 20. Liều lượng kháng thể G20 cần in lên màng là 2 µg/cm và thể tích cộng hợp phát hiện 3YP8-YPF19 cần sử dụng là 4 µl/que thử. Với các thông số tối ưu này, que thử cho phép phát hiện kháng nguyên F1 tinh khiết ở ngưỡng phát hiện từ 1-5 ng/ml trong 15 phút. Từ khóa: Yersinia pestis, Kháng nguyên F1, Sắc ký miễn dịch. 1. MỞ ĐẦU Dịch hạch là một bệnh truyền nhiễm tiến triển cấp tính, cực nguy hiểm do vi khuẩn Yersinia pestis gây ra. Bệnh lưu hành trong quần thể một số loài động vật gặm nhấm (chủ yếu là chuột) và bọ chét ký sinh trên chúng rồi từ đó lây truyền sang người qua trung gian bọ chét nhiễm khuẩn. Trong lịch sử loài người được ghi nhận cho đến nay, dịch hạch là loại bệnh truyền nhiễm với số ca tử vong cao nhất (khoảng 200 triệu ca) (Perry và Fetherston, 1997). Hiện nay, bệnh dịch .