tailieunhanh - Biểu hiện gen mã hóa endo 1,4 β-xylanase chịu nhiệt, hoạt động trong môi trường axit ứng dụng trong sản xuất thức ăn chăn nuôi

Tính bền nhiệt và khả năng hoạt động ở pH thấp là những yếu tố quan trọng quyết định chất lượng của xylanase ứng dụng trong chăn nuôi. Những đặc tính này giúp xylanase chịu được quá trình ép viên ở nhiệt độ cao và hoạt động tốt trong dịch dạ dày động vật. Trong nghiên cứu này, để tạo xylanase tái tổ hợp, đoạn gen có độ dài 636 nucleotide mã hóa endo-1,4-β-xylanase dựa trên trình tự FJ212324 (Xyl11B) của Bispora sp. MEY-1 được tối ưu hóa codon và tổng hợp hóa học. | Biểu hiện gen mã hóa endo 1,4 β-xylanase chịu nhiệt, hoạt động trong môi trường axit ứng dụng trong sản xuất thức ăn chăn nuôi Vietnam J. Agri. Sci. 2016, Vol. 14, No. 3: 400-408 Tạp chí KH Nông nghiệp Việt Nam 2016, tập 14, số 3: 400-408 BIỂU HIỆN GEN MÃ HÓA ENDO-1,4-β-XYLANASE CHỊU NHIỆT, HOẠT ĐỘNG TRONG MÔI TRƯỜNG AXIT NHẰM ỨNG DỤNG TRONG SẢN XUẤT THỨC ĂN CHĂN NUÔI Đặng Thị Kim Anh1, Thân Thị Hương1, Nguyễn Thanh Thủy1, Đặng Tất Thành1, Vũ Nguyên Thành1*, Lisbeth Cecilia Olsson2 1 Trung tâm Vi sinh vật Công nghiệp, Viện Công nghiệp Thực Phẩm, 2Department of Chemical and Biological Engineering, Chalmers University of Technology, Gothenburg, Sweden Email*: thanh@ Ngày gửi bài: Ngày chấp nhận: TÓM TẮT Xylanase là chất phụ gia thức ăn chăn nuôi được sử dụng rộng rãi nhằm giảm độ nhớt, cải thiện khả năng tiêu hóa của vật nuôi. Tính bền nhiệt và khả năng hoạt động ở pH thấp là những yếu tố quan trọng quyết định chất lượng của xylanase ứng dụng trong chăn nuôi. Những đặc tính này giúp xylanase chịu được quá trình ép viên ở nhiệt độ cao và hoạt động tốt trong dịch dạ dày động vật. Trong nghiên cứu này, để tạo xylanase tái tổ hợp, đoạn gen có độ dài 636 nucleotide mã hóa endo-1,4-β-xylanase dựa trên trình tự FJ212324 (Xyl11B) của Bispora sp. MEY-1 được tối ưu hóa codon và tổng hợp hóa học. Gen tổng hợp sau đó được chuyển vào genome của Pichia pastoris X33 và biểu hiện ngoại bào sử dụng vector pPICZαA. Hoạt lực xylanase của chủng tái tổ hợp sau 10 ngày nuôi cấy trên môi -1 trường khoáng với methanol là nguồn carbon duy nhất đạt 96 . Endo-1,4-β-xylanase sau tinh sạch có kích thước 30 kDa, hoạt động ở pH thấp và tối ưu ở 65 C, pH 3,0. Enzyme tái tổ hợp khá bền nhiệt và duy trì 90% hoạt tính sau khi xử lý ở 70 C trong 20 phút. Enzyme bền với pepsin, một protease chính trong dịch tiêu hóa của dạ dày. 2+ 2+. Xylanase tái tổ hợp bị ức chế bởi sự có mặt của SDS, ion