tailieunhanh - Nghiên cứu chuyển gen kháng sâu Cryiab vào cây cà chua (Lycopersicon esculentum Mill.) bằng phương pháp sử dụng vi khuẩn Agrobacterium tumefaciens

Mục đích của nghiên cứu này là chuyển gen kháng sâu cryIAb vào cây cà chua (Lycopersicon esculentum Mill.) bằng phương pháp sử dụng vi khuẩn Agrobacterium. Kháng sinh Kanamycin được dùng như một chất chọn lọc. Chủng Agrobacterium tumefaciens EHA105 mang plasmid CAMBIA2301cryIAb chứa gen kháng kanamycin (nptII), gen GusA và gen kháng sâu cryIAb. Chúng tôi nghiên cứu một vài yếu tố ảnh hưởng đến khả năng chuyển gen cà chua như nồng độ của vi khuẩn Agrobacterium tumefaciens và nồng độ acetosyringone trong quá trình xâm nhiễm. Để phục vụ cho việc chuyển gen, lá mầm 10 ngày tuổi được dùng làm nguyên liệu. Sau 2 ngày xử lí chuyển gen lá mầm được rửa và cấy trên môi trường tái sinh MS có chứa chất sinh trưởng IAA (0,5 mg/l), BA (2 mg/l), chất chọn lọc kanamycin (100 mg/l) và 500 mg/l kháng sinh cefotaxime để diệt vi khuẩn. Sau vài tuần chọn lọc trong môi trường trên, các chồi kháng chất chọn lọc kanamycin sẽ được chuyển sang môi trường MS để phát triển và tạo rễ. Sự biểu hiện của gen GusA được kiểm tra bởi chất chỉ thị X-Glu. Sự hiện diện của gen nptII và gen cryIAb trong cây cà chua giả định chuyển gen đã được khẳng định bằng kỹ thuật PCR. Sự biểu hiện của độc tố tạo bởi gen kháng sâu cryIAb trong lá cây cà chua giả định chuyển gen đã được kiểm tra bởi Kit Quickstix strip của công ty Envirologix (Mỹ). | Nghiên cứu chuyển gen kháng sâu Cryiab vào cây cà chua (Lycopersicon esculentum Mill.) bằng phương pháp sử dụng vi khuẩn Agrobacterium tumefaciens TẠP CHÍ SINH HỌC, 2012, 34(3SE): 205-211 NGHIÊN CỨU CHUYỂN GEN KHÁNG SÂU cryIAb VÀO CÂY CÀ CHUA (Lycopersicon esculentum Mill.) BẰNG PHƯƠNG PHÁP SỬ DỤNG VI KHUẨN Agrobacterium tumefaciens Lê Tấn Đức1*, Phạm Đức Trí1, Nguyễn Hữu Hổ1, Hà Trần Minh Dũng1, Dương Thị Ngọc Thi2 (1) Viện Sinh học nhiệt đới, Viện Khoa học và Công nghệ Việt Nam, (*)tanduc2007@ (2) Trung tâm Nghiên cứu và Phát triển Nông nghiệp công nghệ cao tp Hồ Chí Minh TÓM TẮT: Mục đích của nghiên cứu này là chuyển gen kháng sâu cryIAb vào cây cà chua (Lycopersicon esculentum Mill.) bằng phương pháp sử dụng vi khuẩn Agrobacterium. Kháng sinh Kanamycin được dùng như một chất chọn lọc. Chủng Agrobacterium tumefaciens EHA105 mang plasmid CAMBIA2301cryIAb chứa gen kháng kanamycin (nptII), gen GusA và gen kháng sâu cryIAb. Chúng tôi nghiên cứu một vài yếu tố ảnh hưởng đến khả năng chuyển gen cà chua như nồng độ của vi khuẩn Agrobacterium tumefaciens và nồng độ acetosyringone trong quá trình xâm nhiễm. Để phục vụ cho việc chuyển gen, lá mầm 10 ngày tuổi được dùng làm nguyên liệu. Sau 2 ngày xử lí chuyển gen lá mầm được rửa và cấy trên môi trường tái sinh MS có chứa chất sinh trưởng IAA (0,5 mg/l), BA (2 mg/l), chất chọn lọc kanamycin (100 mg/l) và 500 mg/l kháng sinh cefotaxime để diệt vi khuẩn. Sau vài tuần chọn lọc trong môi trường trên, các chồi kháng chất chọn lọc kanamycin sẽ được chuyển sang môi trường MS để phát triển và tạo rễ. Sự biểu hiện của gen GusA được kiểm tra bởi chất chỉ thị X-Glu. Sự hiện diện của gen nptII và gen cryIAb trong cây cà chua giả định chuyển gen đã được khẳng định bằng kỹ thuật PCR. Sự biểu hiện của độc tố tạo bởi gen kháng sâu cryIAb trong lá cây cà chua giả định chuyển gen đã được kiểm tra bởi Kit Quickstix strip của công ty Envirologix (Mỹ). Từ khóa: .

• Sinh học
• Chuyển gen kháng sâu Cryiab
• Cây cà chua Lycopersicon esculentum Mill
• Sử dụng vi khuẩn Agrobacterium tumefaciens
• Vi khuẩn Agrobacterium tumefaciens
• Khả năng chuyển gen
• Tạp chí khoa học
• Tạp chí sinh học
• Chuyển gen kháng sâu vào cây cà chua
• Giảm tác hại của sâu hại cà chua
• Chuyển gen Coda
• Mã hóa Choline Oxidase
• Cây Xoan ta (Melia azedarach L
• Tăng cường khả năng chịu hạn
• Gen codA ở cây chuyển gen
• Tóm tắt Luận án Tiến sĩ
• Luận án Tiến sĩ Sinh học
• Di truyền học
• Cây đậu tương
• Cấu trúc chuyển gen mang gen codA
• Giống đậu tương ĐT22
• Hiệu quả chuyển gen
• Hiệu quả chuyển gen CodA
• Khả năng chống chịu các stress phi sinh học
• Kỹ thuật chuyển gen
• Luận văn Thạc sĩ Công nghệ sinh học
• Công nghệ sinh học
• Tái sinh in vitro
• Quy trình chuyển gen
• Cơ chế chuyển gen vào thực vật
• Khảo sát khả năng kháng oxy hóa
• Khả năng kháng oxy hóa
• Cây rau sam
• Portulaca oleracea L
• Phương pháp HPLC ESR
• Phương pháp in vitro
• Ruồi giấm chuyển gen
• Luận án Tiến sĩ
• Đặc tính chịu hạn
• Đặc tính chịu mặn
• Phương pháp chuyển gen GmDREB6
• Nghiên cứu chuyển gen codA
• Cơ chế chịu hạn ở thực vật
• Tạp chí Khoa học Công nghệ Nông nghiệp
• Bài viết về nông nghiệp
• Ngô chuyển gen chịu hạn ZmDREB2A
• Khả năng chịu hạn của cây ngô
• Giống ngô chịu hạn
• Khả năng tái sinh giống dưa chuột
• Giống dưa chuột choka F1
• Chuyển gen chỉ thị của dưa chuột
• Thời gian thu hoạch dưa chuột choka F1
• Sinh trưởng dưa chuột choka F1
• Khả năng tái sinh in vitro
• Năng suất giống lúa
• Oryza sativar l
• Chất lượng tạo giống lúa mới
• Phương pháp tạo giống thông qua mô sẹo
• Kĩ thuật chuyển gen
• Chuyển hóa đường
• Liên kết không cân bằng
• Nghiên cứu trên hệ gen
• Chuyển hóa đường từ rơm rạ của cây lúa
• Giống lúa thuộc nhóm Indica
• cách làm luận văn
• cách trình bày luận văn
• hướng dẫn làm luận văn
• luận văn ngành công nghệ sinh học
• khả năng chuyển nạp gen
• Luận án tiến sĩ Nông nghiệp
• Di truyền và chọn giống cây trồng
• Virus khảm vàng
• Kỹ thuật chuyển gen RNAi
• Đánh giá tác động của Polybrene
• Tác động của Polybrene
• Quá trình chuyển gen GFP
• Tế bào gốc trung mô
• Khả năng phát sáng của tế bào
• Luận văn Thạc sĩ Sinh học
• Sinh học thực nghiệm
• Tích lũy tinh bột
• Cây thuốc lá chuyển gen
• Mã hóa enzyme agpase
• Enzyme đồng hóa nitrogen
• Chuyển hóa glutamic acid
• Cấu trúc mang gen GS1
• Đoạn thân mầm cây in vitro
• khả năng chuyển nạp gene
• Khóa luận tốt nghiệp đại học
• Công nghệ thực phẩm
• Tái sinh in vitro cây lúa
• Quá trình tiến hóa của lúa trồng
• Quy trình chuyển gen lúa
• Quy trình tái sinh cây
• Tạp chí Nông nghiệp
• Phẩm chất cây trồng
• Năng suất cây trồng
• Khả năng chống chịu bệnh hại
• hệ sinh thái
• chuyên đề nông học
• tài nguyên môi trường
• nuôi trồng thủy sản
• kinh tế xã hội
• nghiên cứu khoa học
• Đặc điểm sinh học cây đậu tương
• Khả năng sinh trưởng cay đậu tương
• Đốt lá mầm
• Hệ thống tái sinh
• Nông nghiệp Việt Nam
• Tài liệu nông nghiệp
• Khả năng chịu hạn
• Chuyển gen lúa
• Nhân tố phiên mã
• Hệ thống tái sinh in vitro
• Cây đậu Nho nhe
• Chuyển gen ở cây đậu đỗ
• Sự nảy mầm của hạt đậu Nho nhe
• Khả năng ra rễ của chồi in vitro