tailieunhanh - Bước đầu tạo cây thuốc lá (Nicotiana Tabacum L.) chuyển gien nhờ vi khuẩn Agrobacterium Tumefaciens

Bài viết nghiên cứu nhằm tạo ra giống cây thuốc lá có tính kháng khuẩn, giảm sử dụng nông dược, nâng cao năng suất cây trồng, gien độc tố bở Bt của vi khuẩn Bacillus thuringiensis đã được chuyển vào cây thuốc lá nhờ vi khuẩn Agrobacterium Tumefaciens. | Bước đầu tạo cây thuốc lá (Nicotiana Tabacum L.) chuyển gien nhờ vi khuẩn Agrobacterium Tumefaciens 25(1): 55-60 T¹p chÝ Sinh häc 3-2003 B¦íc ®Çu t¹o c©y thuèc l¸ (Nicotiana tabacum L.) chuyÓn gien nhê vi khuÈn Agrobacterium tumefaciens trÇn thÞ dung Tr−êng ®¹i häc N«ng-L©m, Tp. Hå ChÝ Minh nguyÔn h÷u hæ ViÖn Sinh häc nhiÖt ®íi Trong môc ®Ých t¹o ra c¸c gièng thuèc l¸ cã EHA 105 mang plasmit pIBT2 kÝch th−íc 15,3 tÝnh kh¸ng s©u, gi¶m sö dông n«ng d−îc, n©ng kb do ViÖn Sinh häc nhiÖt ®íi cÊu tróc. cao n¨ng suÊt c©y trång, gien ®éc tè Bt cña vi Gien chuyÓn n¹p: khuÈn Bacillus thuringiensis ®4 ®−îc chuyÓn vµo c©y thuèc l¸ nhê vi khuÈn Agrobacterium - Gien gus A: gien m4 hãa cho enzym β- tumefaciens. Sù cã mÆt cña gien Bt ë c©y glucuronidaza ®−îc ph©n lËp tõ vi khuÈn . chuyÓn gien buéc c©y trång sinh ra c¸c protein β-glucuronidaza lµ mét hydrolaza cã t¸c dông ®éc tè ®Ó tù b¶o vÖ m×nh chèng l¹i s©u g©y h¹i xóc t¸c sù ph©n gi¶i c¸c β-glucorunit (c¬ chÊt thuéc hä C¸nh v¶y. Gien chØ thÞ gus A vµ gien X-gluc) t¹o ra s¶n phÈm mµu xanh chµm ®Æc chän läc bar ®−îc g¾n vµo plasmit pIBT 2 nh»m tr−ng dÔ nhËn biÕt. ®Ó chän läc vµ ®¸nh gi¸ kÕt qu¶ chuyÓn gien. - Gien bar: gien m4 hãa cho enzym Ph−¬ng ph¸p PCR ®−îc dïng ®Ó kiÓm tra sù phosphinothricin axetyltransferaza cã nguån gèc hiÖn diÖn cña gien Bt ë møc ph©n tö. tõ vi khuÈn Streptomyces hygroscopicus. Enzym nµy cã t¸c dông lµm mÊt ®éc tÝnh cña I. ph−¬ng ph¸p nghiªn cøu phosphinothricin (PPT), ho¹t chÊt chÝnh cña thuèc diÖt cá, b»ng c¸ch biÕn ®æi PPT tõ d¹ng 1. VËt liÖu cã tÝnh diÖt cá sang d¹ng bÞ axªtyl hãa kh«ng cã Nguyªn liÖu chuyÓn gien: mÉu l¸ cña c©y tÝnh diÖt cá. thuèc l¸ sîi vµng K326 in vitro ®−îc nu«i cÊy tõ - Gien cry1A(c) (gien Bt): m4 hãa cho 1 th¸ng tuæi trë lªn. protein ®éc tè (thuéc lo¹i δ-endotoxin) cña vi Vi khuÈn vµ plasmit mang gien chuyÓn n¹p: khuÈn Bacillus thuringiensis g©y ®éc cho s©u chñng vi khuÈn Agrobacterium tumefaciens thuéc bé C¸nh v¶y