tailieunhanh - Tạo đột biến ở vị trí axit Aspactic 101 (D101) của Enzym Epoxit Hydrolaza ở hạt đậu tương bằng kỹ thuật PCR

Bài viết nghiên cứu tạo đột biến ở vị trí axit Aspactic 101 (D101) của Enzym Epoxit Hydrolaza ở hạt đậu tương bằng kỹ thuật PCR. bài viết để nắm chi tiết nội dung nghiên cứu. | Tạo đột biến ở vị trí axit Aspactic 101 (D101) của Enzym Epoxit Hydrolaza ở hạt đậu tương bằng kỹ thuật PCR 26(4): 41-45 T¹p chÝ Sinh häc 12-2004 T¹o ®ét biÕn ë vÞ trÝ axÝt aspactic 101 (D101) cña enzym EPOxit hydrolaza ë h¹t ®Ëu t−¬ng b»ng kü thuËt PCR Nghiªm Ngäc Minh ViÖn C«ng nghÖ sinh häc Chikafusa Fukazawa ViÖn C«ng nghiÖp thùc phÈm quèc gia NhËt B¶n Epoxit hydrolaza (EHs) lµ nh÷ng enzym kh¸ i. ph−¬ng ph¸p nghiªn cøu phæ biÕn cã chøc n¨ng xóc t¸c ®Ó thñy ph©n vßng epoxy thµnh mét s¶n phÈm cã 2 nhãm 1. Nguyªn liÖu hydroxyl (diols) gÇn nhau khi cã mÆt mét ph©n ADN plasmit cã mang tr×nh tù cDNA cña tö n−íc (H2O). Trong nh÷ng n¨m gÇn ®©y, mét gien EH b×nh th−êng ë h¹t ®Ëu t−¬ng (dïng lµm sè phßng thÝ nghiÖm ®· quan t©m nghiªn cøu tíi khu«n cho ph¶n øng PCR), lÊy tõ phßng thÝ cÊu tróc, vai trß vµ chøc n¨ng cña enzym nµy ë nghiÖm cña Dr. Fukazawa- NhËt B¶n. ng−êi [1, 2], ®éng vËt [3, 11], c«n trïng [4] vµ vi sinh vËt [5, 6] Trong h¹t thùc vËt cã chøa Takara Ex taqTM Kit cña h·ng Takara Shuzo mét sè axÝt bÐo kh¸c nhau cã vßng epoxy vµ co., LTD. NhËt B¶n: dïng trong ph¶n øng PCR, nh÷ng dÉn xuÊt cña chóng, cã thÓ cã chøc n¨ng TA Cloning(R) Kit cã vÐct¬ , T4 DNA kh¸ng nÊm tù nhiªn [7, 8]. N¨m 1995, Katsube ligaza, tÕ bµo kh¶ biÕn E. coli INV F' cña h·ng cs. ®· c«ng bè tr×nh tù cDNA m· ho¸ cho InvitrogienTM. enzym EH [9]. Sau ®ã, Masaomi vµ cs. còng ®· Kit ®äc tr×nh tù: Thermo Sequenase th«ng b¸o kÕt qu¶ biÓu hiÖn vµ lµm s¹ch ®−îc fluorescent labelled primer cycle sequencing kit enzym nµy trong h¹t ®Ëu t−¬ng ë d¹ng hoµ tan with 7-deaza-dGTP (RPN 2438/ RPN 2538) cña [10]. Trong chuçi axÝt amin cña EH, axÝt h·ng Amersham pharmacia biotech. Måi ®äc aspactic ë mét sè vÞ trÝ nh− D103 cña tr×nh tù: Fluorescein-Labeled Primer M4 (5´- Arabidopsis, D101 cña thuèc l¸, D334 cña CGCCAGGGTTTTCCCAGTCACGAC-3´) vµ ng−êi. lµ mét axÝt amin kh¸ b¶o thñ vµ cã thÓ Fluorescein-Labeled Primer RV-M (5´- cã vai trß nhÊt ®Þnh trong .