tailieunhanh - Nghiên cứu chế tạo xét nghiệm ELISA kiểu sandwich sử dụng 3 loại kháng thể đặc hiệu phát hiện nọc rắn lục xanh và hổ đất

Cộng hợp kháng thể kháng IgG của thỏ gắn enzym peroxidase để phát hiện kháng thể thỏ đã gắn vào kháng nguyên nọc rắn trong mẫu xét nghiệm được kháng thể ngựa bắt giữ. Từ xét nghiệm ELISA đơn lẻ cho từng loài rắn, đã thiết kế và chế tạo thành công bộ kít cùng lúc có thể sử dụng cho xét nghiệm 3 loại bệnh phẩm gồm máu, nước tiểu và dịch vết cắn hoặc dịch nốt phỏng. | TẠP CHÍ Y - DƢỢC HỌC QUÂN SỰ SỐ 9-2011 NGHIÊN CỨU CHẾ TẠO XÉT NGHIỆM ELISA KIỂU SANDWICH SỬ DỤNG 3 LOẠI KHÁNG THỂ ĐẶC HIỆU PHÁT HIỆN NỌC RẮN LỤC XANH VÀ HỔ ĐẤT Đỗ Khắc Đại*; Nguyễn Trường Sơn**; Lê Văn Đông* TÓM TẮT Lần đầu tiên tại Việt Nam, chúng tôi đã sử dụng mô hình 3 kháng thể đặc hiệu để chế tạo xét nghiệm ELISA phát hiện và phân biệt nọc độc của 2 loài rắn độc thường gây tai nạn ở Việt Nam là rắn Lục xanh (Trimeresurus albolabris) và Hổ đất (Naja kaouthia) với ngưỡng phát hiện đạt mức nanogram/ml máu, nước tiểu và dung dịch đệm. Kháng thể ngựa, loại đang sử dụng để điều trị trên lâm sàng do IVAC cung cấp, được dïng làm kháng thể bắt giữ. Kháng thể thỏ đặc hiệu với từng nọc rắn được dùng làm kháng thể phát hiện. Cộng hợp kháng thể kháng IgG của thỏ gắn enzym peroxidase để phát hiện kháng thể thỏ đã gắn vào kháng nguyên nọc rắn trong mẫu xét nghiệm được kháng thể ngựa bắt giữ. Từ xét nghiệm ELISA đơn lẻ cho từng loài rắn, đã thiết kế và chế tạo thành công bộ kít cùng lúc có thể sử dụng cho xét nghiệm 3 loại bệnh phẩm gồm máu, nước tiểu và dịch vết cắn hoặc dịch nốt phỏng. Bước đầu thử nghiệm với bệnh phẩm lấy từ BN rắn độc cắn cho thấy bộ kít có khả năng phát hiện và phân biệt nọc độc của 2 loài rắn nghiên cứu. * Từ khoá: Rắn độc cắn; Xét nghiệm ELISA; Kít phát hiện nọc rắn; Rắn Lục xanh; Rắn Hổ đất. DEVELOPMENT OF SANDWICH ELISA USING 3 SPECIFICITY ANTIBODIES FOR DETECTION OF VENOMS OF GREEN PIT VIPER AND COMMON COBRA SUMMARY We have been successful for the first time, in developing a snake venom detection kit by utilizing 3 specificity antibodies for the identification of venoms of the two common venomous snakes in Vietnam viz. green pit viper (Trimeresurus albolabris) and common cobra (Naja kaouthia) with the sensitivity at nanogram levels in whole blood, urine and sample buffer. Venoms-specific horse antisera (supplied by IVAC to be used in treatment of snake-bite victims) were used as the capture * Học viện Quân y ** Bệnh viện Chợ Rẫy Phản biện khoa