tailieunhanh - Ebook Công nghệ Gen: Phần 2

Nối tiếp nội dung phần 1, phần 2 cuốn sách cung cấp cho người học các kiến thức: Phương pháp lai phân tử và phương pháp đánh dấu phân tử, các loại vật chủ thu nhận và các loại vectơ chọn dòng, các loại vectơ trong tạo dòng,. nội dung chi tiết. | c HUƠ NG VIII PHƯƠNG PHÁP LAI PHÂN TỬ VÀ PHƯƠNG PHÁP ĐÁNH DÂU PHÂN TỬ I. PHƯƠNG PHÁP LAI AXIT NUCLEIC Phương pháp lai axil nucleic còn gọi là phương pháp lai phân tử. Cơ sở của hiện tượng lai phân tử là sự tách rời hai mạch đôi của chuỗi xoắn kép ADN khi nhiệt dộ môi trường vượt quá nhiệt nóng chảy Tm của phân tử và sự lái bắt cặp giữa các trình tự tương đồng sau đó. Các trình tự bổ sung có thể là ADN hay ARN để tạo thành các phân tử mới là ADN - ADN ARN và ADN - ARN. Đây là sự lai phân tử đặc hiệu tuyệt đối. Các yếu tõ ảnh hưởng đến sự lai phân tử gồm có nồng độ ADN trong mùi trường nhiệt độ và thời gian phản ứng kích thước các trình tự lai lực ion của môi trường. Hiện có ba kiểu lai phán tử ADN. 1. Lai trong pha lỏng Các trình tự cần lai nằm trong pha lỏng. Sự lai phán tử xảy ra khi các trình lự này gặp nhau do chuyển động nhiệt và khi nhiệt độ môi trường thấp hơn Tin ít nhâì vài độ. Phương pháp này được sử dụng để tính tỷ lệ phán trảm các trình tự giống nhau ở các loài gần nhau để phân tích các trình tự lặp lại và ứng dụng trong việc so sánh kích thước các bộ gen không chứa trình tự lặp lại. Ba phương pháp thường được sử dụng để phân tích định lượng các phân lử lai là - phương pháp dùng quang phổ kế - phương pháp sử dụng nucleaza S và - phương pháp sắc ký trên hỵdroxylapatit. 124 ADN mạch đôi hấp thu ánh sáng yếu hơn mạch dơn do đó trong phân tử lai sự giảm OD 260 nm tương ứng với sự tãng số lượng các phân tử lai. Nucleaza Sj có khả năng thuỷ phân các nucleotit mạch đơn vì vậy dung dịch phản ứng lai cho tác dụng với enzym này thì chỉ còn các phân tử lai là không bị thuỷ phân trên cơ sớ đó tủa và định lượng được các phân tử lai. Trong phương pháp sắc ký trẽn hydroxylapatit photphat canxi gắn các axit nucleic mạch đôi trên cơ sớ đó tách được các phân tử lai đế định lượng. 2. Lai trên pha rán Lai trên pha rắn có cùng nguyên tắc với lai trẽn pha lỏng. Điểm khác biệt ở dây là một trong hai trình tự bổ sung được cố định trên một giá thể rắn màng lai . Việc sử .

TỪ KHÓA LIÊN QUAN
crossorigin="anonymous">
Đã phát hiện trình chặn quảng cáo AdBlock
Trang web này phụ thuộc vào doanh thu từ số lần hiển thị quảng cáo để tồn tại. Vui lòng tắt trình chặn quảng cáo của bạn hoặc tạm dừng tính năng chặn quảng cáo cho trang web này.