tailieunhanh - Xây dựng quy trình chiết xuất và phương pháp định lượng Stigmasterol trong cây ráy (Alocasia odora (Roxb.) C. Koch) bằng sắc ký lỏng hiệu năng cao
Hiện nay, xu hướng và yêu cầu tiêu chuẩn hóa chất lượng dược liệu theo WHO nói chung cũng như ở Việt Nam nói riêng là phải xây dựng được quy trình xác định hàm lượng hoạt chất hoặc chất đặc trưng chiếm tỷ lệ lớn trong dược liệu. Vì vậy trong bài báo này, các tác giả giới thiệu kết quả nghiên cứu phương pháp định lượng stigmasterol trong cây ráy bằng sắc ký lỏng hiệu năng cao (HPLC). | TẠP CHÍ KHOA HỌC, Đại học Huế, Số 63, 2010 XÂY DỰNG QUY TRÌNH CHIẾT XUẤT VÀ PHƯƠNG PHÁP ĐỊNH LƯỢNG STIGMASTEROL TRONG CÂY RÁY (Alocasia odora (Roxb.) C. Koch) BẰNG SẮC KÝ LỎNG HIỆU NĂNG CAO Trần Hữu Dũng Trường Đại học Y Dược, Đại học Huế Đặng Thị Ngọc Hoa Trường Đại học Khoa học, Đại học Huế TÓM TẮT Quy trình chiết xuất stigmasterol toàn phần từ bột dược liệu ráy (Alocasia odora (Roxb.) C. Koch) trên soxhlet trong 5 giờ trong dung môi chloroform được thực hiện và kiểm soát bằng phương pháp sắc ký lớp mỏng khi triển khai trên hệ dung môi n-hexan/ethyl axetat (8:2), xác định vết bằng thuốc thử Liebermann-Burchard. Hàm lượng stigmasterol được xác định bởi phương pháp HPLC nhanh chóng và có độ nhạy cao, trên cột C8 với nhiệt độ cột 300C ± 1, hệ dung môi pha động là acetonitril/đệm phosphate (93:7) pH 4,8 với tốc độ dòng 1ml/phút, thể tích tiên 20µl, bước sóng phát hiện tại 195nm. Phương pháp HPLC cho tương thích cao với các thông số sắc ký có RSD 7, chiết trong ete dầu hoả và loại nước bằng Na2SO4 khan, cô dịch ete thu được cắn. Hòa tan cắn trong 1ml CHCl3 để chấm sắc ký. Dung dịch chuẩn: cân stigmasterol hòa tan trong 1ml CHCl3 Triển khai trên bản Silica gel F254 với các hệ dung môi khác nhau: n-hexan/ethyl acetate (9:1), n-hexan/ethyl acetate (8:2), n-hexan/ethyl acetate (7:3), CHCl3/MeOH (98:2) và CHCl3/CH3COCH3 (8:2) để chọn hệ pha động thích hợp nhất [2]. Phát hiện peak phytosterol bằng thuốc thử Liebermann-Burchard. dựng quy trình chiết stigmasterol toàn phần bằng phương pháp chiết Soxhlet Cân 5g bột ráy, ngâm lạnh 12 giờ với các hệ dung môi chiết CHCl3/MeOH (1:1), (2:1) và CHCl3 100%, chiết Soxhlet với cùng hệ dung môi ngâm lạnh trong 3 giờ, ở 650C để chọn hệ dung môi thích hợp nhất cho việc khảo sát thời gian chiết kiệt stigmasterol tại 3, 4 và 5h để chọn thời gian chiết tối ưu [6]. Hiệu quả chiết xuất được đánh giá bằng tín hiệu peak stigmasterol trên TLC với thuốc thử Liebermann-Burchard sau khi dịch chiết được thủy phân bằng HCl 1M/MeOH .
đang nạp các trang xem trước
