tailieunhanh - Biểu hiện và tinh sạch protein nội độc tố Staphylococcal enterotoxin (Seb) trong các chủng Staphylococcus aureus phân lập từ các vụ ngộ độc thực phẩm

Trong nghiên cứu này, với mục đích biểu hiện và tinh sạch protein SEB dạng tự nhiên, chúng tôi đã tiến hành phân lập các chủng từ các vụ ngộ độc thực phẩm, tách dòng gen SEB bằng vector tách dòng pJet, thiết kế thành công vector biểu hiện pET21a+ mang gen mã hóa cho kháng nguyên tái tổ hợp SEB dạng tự nhiên có độc tính và biểu hiện trong tế bào vi khuẩn E. coli BL21 (DE3). | Nghiêm Ngọc Minh và Đtg Tạp chí KHOA HỌC & CÔNG NGHỆ 86(10): 179 - 183 BIỂU HIỆN VÀ TINH SẠCH PROTEIN NỘI ĐỘC TỐ STAPHYLOCOCCAL ENTEROTOXIN (SEB) TRONG CÁC CHỦNG STAPHYLOCOCCUS AUREUS PHÂN LẬP TỪ CÁC VỤ NGỘ ĐỘC THỰC PHẨM Nghiêm Ngọc Minh*, Hầu Thị Thu Trang, Nguyễn Thị Hoài Thu Viện Công nghệ sinh học TÓM TẮT Độc tố ruột staphylococcal enterotoxin B (SEB) của vi khuẩn Staphylococcus aureus là một trong những nguyên nhân chính gây ngộ độc thực phẩm. Trong nghiên cứu này, với mục đích biểu hiện và tinh sạch protein SEB dạng tự nhiên, chúng tôi đã tiến hành phân lập các chủng từ các vụ ngộ độc thực phẩm, tách dòng gen SEB bằng vector tách dòng pJet, thiết kế thành công vector biểu hiện pET21a+ mang gen mã hóa cho kháng nguyên tái tổ hợp SEB dạng tự nhiên có độc tính và biểu hiện trong tế bào vi khuẩn E. coli BL21 (DE3). Các điều kiện để làm tăng khả năng biểu hiện gen SEB cũng đã đƣợc nghiên cứu và tối ƣu hóa. Cũng trong nghiên cứu này, protein tái tổ hợp SEB đƣợc tinh sạch thành công bằng cột Nikel Resin phục vụ làm nguyên liệu tạo SEB tái tổ hợp ở dạng đột biến không có độc tính, làm nguyên liệu cho việc tạo Kit phát hiện nhanh ngộ độc thực phẩm do độc tố tụ cầu vàng ở giai đoạn sau. Từ khóa: Staphylococcus aureus, SEB, protein tái tổ hợp, nội độc tố, ngộ độc thực phẩm. MỞ ĐẦU Hiện nay, tình hình ngộ độc thực phẩm có chiều hƣớng gia tăng cả ở Việt Nam và trên thế giới với hậu quả ngày càng nghiêm trọng, điều đáng quan tâm là một trong số nguyên nhân gây ngộ độc đƣợc xác định do vi sinh vật gây ra. Trong đó Staphylococcus aureus là một trong số các vi sinh vật sinh độc tố gây ngộ độc thực phẩm thƣờng xuyên đƣợc tìm thấy từ các vụ ngộ độc. Chúng lại có khả năng kháng methiciline, penicillin nên khi gặp điều kiện thuận lợi còn có thể lây lan và gây những căn bệnh nguy hiểm. Điều đáng chú ý ở đây là chúng có khả năng tiết ra một số độc tố bền với nhiệt và khó bị phân hủy ở nhiệt độ cao. Một trong số đó là độc tố ruột staphylococcal enterotoxin B (SEB) .