tailieunhanh - Kỹ thuật LAMP (Loop-mediated isothermal amplification) - Hướng đi mới trong việc tạo kit phát hiện nhanh bệnh truyền nhiễm

Kỹ thuật tái bản đẳng nhiệt (LAMP) là một phương pháp tái bản acid nucleic (DNA hoặc RNA) trong một nhiệt độ duy nhất sử dụng một bộ mồi được thiết kế đặc biệt và một DNA polymerase có khả năng vừa tách mạch đôi vừa tổng hợp. Sản phẩm DNA là cấu trúc gốc vòng do sự lặp lại nhiều lần của gen đích. | Hoàng Phú Hiệp và Đtg Tạp chí KHOA HỌC & CÔNG NGHỆ 90(02): 43 - 48 KỸ THUẬT LAMP (LOOP-MEDIATED ISOTHERMAL AMPLIFICATION)HƢỚNG ĐI MỚI TRONG VIỆC TẠO KIT PHÁT HIỆN NHANH BỆNH TRUYỀN NHIỄM Hoàng Phú Hiệp1, Lê Quang Huấn2* 1 Trường Đại học Sư Phạm Thái Nguyên; 2 Viện Công nghệ Sinh học, VAST TÓM TẮT Kỹ thuật tái bản đẳng nhiệt (LAMP) là một phƣơng pháp tái bản acid nucleic (DNA hoặc RNA) trong một nhiệt độ duy nhất sử dụng một bộ mồi đƣợc thiết kế đặc biệt và một DNA polymerase có khả năng vừa tách mạch đôi vừa tổng hợp. Sản phẩm DNA là cấu trúc gốc vòng do sự lặp lại nhiều lần của gen đích. LAMP là phƣơng pháp có độ đặc hiệu cao, hiệu quả, nhanh chóng và sản phẩm có thể quan sát trực tiếp trong ống phản ứng, do vậy phƣơng pháp LAMP có thể là một phƣơng pháp đặc biệt hữu ích để chẩn đoán bệnh truyền nh iễm nhƣ nhƣ virus, vi khuẩn, ký sinh trùng . Từ khoá: LAMP, PCR, mồi FIP, mồi BIP, DNA gốc vòng. MỞ ĐẦU* Kỹ thuật LAMP (Loop-mediated isothermal amplifcation ) đƣợc nghiên cứu và phát triển bởi công ty Eiken Chemical Co. Ltd. Đây một phƣơng pháp nhân bản gen mới , có thể tổng hợp một đoạn DNA lớn mà không cần các chu trì nh biến nhiệt [1]. Đặc điểm phƣơng pháp là sử dụng 4 mồi khác nhau đƣợc thiết kế đặc biệt để nhận ra 6 vùng riêng biệt trên gen đích và phản ứng diễn ra ở một nhiệt độ duy nhất. Quá trình tái bản và phát hiện gen đích chỉ diễn ra trong một bƣớc duy nhất. Thành phần phản ứng gồm có mẫu, mồi, enzyme DNA polymerase, hỗn hợp phản ứng đƣợc ủ ở 65oC. Phƣơng pháp này có hiệu quả khuyếch đại cao khoảng 109-1010 lần trong 15-60 phút. So với các phƣơng pháp nhƣ PCR, Realtime PCR,. LAMP có nhiều ƣu điểm hơn nhƣ: chính xác, đơn giản, giá thành thấp và đặc biệt là thời gian thực hiện ngắn và có thể phát hiện kết quả bằng mắt thƣờng. Do vậy, LAMP thƣờng đƣợc sử dụng để tạo các bộ kit chẩn đoán nhanh đƣợc phổ biến rộng rãi trên thế giới. Phƣơng pháp LAMP rất đơn giản để thực hiện [2, 3], phƣơng pháp này là phƣơng pháp tổng hợp thay

• Sinh học
• Kỹ thuật LAMP
• Loop mediated isothermal amplification
• Kỹ thuật tái bản đẳng nhiệt
• Phương pháp tái bản acid nucleic
• DNA gốc vòng