tailieunhanh - Nghiên cứu tạo chế phẩm Horse Radish PreoXydase – Progesterone tự gắn dùng trong bộ KIT EIA-P4 và ứng dụng để chẩn đoán có thai sớm ở bò

Đề tài nghiên cứu tạo chế phẩm Horse Radish Peroxydase-progesterone (HRP) sử dụng cho phản ứng ELISA để định lượng hàm lượng progesterone (P4). Kết quả sau 2 lần gắn đã thu được 2,05 ml phức hợp HRP-P4 đậm đặc (HRP-P4 tự gắn). Sau khi xác định đuợc đuờng cong chuẩn, đề tài đã xác định đuợc tỷ lệ pha loãng thích hợp đối với HRP-P4 tự gắn sử dụng cho phản ứng ELISA là 1/500000. | Nguyễn Mạnh Hà và Đtg Tạp chí KHOA HỌC & CÔNG NGHỆ 115(01): 65 - 71 NGHIÊN CỨU TẠO CHẾ PHẨM HORSE RADISH PEROXYDASEPROGESTERONE TỰ GẮN DÙNG TRONG BỘ KIT EIA-P4 VÀ ỨNG DỤNG ĐỂ CHẨN ĐOÁN CÓ THAI SỚM Ở BÕ Nguyễn Mạnh Hà1*, Phan Văn Kiểm2 1 Trường Đại học Nông Lâm – ĐH Thái Nguyên, 2Viện Chăn nuôi Việt Nam TÓM TẮT Đề tài nghiên cứu tạo chế phẩm Horse Radish Peroxydase-progesterone (HRP) sử dụng cho phản ứng ELISA để định lƣợng hàm lƣợng progesterone (P 4). Kết quả sau 2 lần gắn đã thu đƣợc 2,05 ml phức hợp HRP-P4 đậm đặc (HRP-P4 tự gắn). Sau khi xác định đƣợc đƣờng cong chuẩn, đề tài đã xác định đƣợc tỷ lệ pha loãng thích hợp đối với HRP-P4 tự gắn sử dụng cho phản ứng ELISA là 1/500000. Sử dụng HRP-P4 tự gắn cho phản ứng ELISA định lƣợng hàm lƣợng P 4 đối với 29 bò cái lai sinh sản F2, F3 để chẩn đoán có thai sớm cho kết quả chính xác. 16 bò có hàm lƣợng P4 từ 0,250,28ng/ml ở ngày động dục (ngày 0) sau đó tăng nhanh đạt 0,88 mg/ml ở ngày thứ 7, đạt 1,83 ng/ml ở ngày thứ 21 và đạt 2,41 ng/ml ở ngày 25 sau phối giống đƣợc chẩn đoán đã có thai. Sử dụng HRP-P4 tự gắn có thể thay thế cho HRP-P4 nhập ngoại trong bộ Kit EIA-P4 trong phản ứng ELISA để định lƣợng hàm lƣợng P4 phục vụ chẩn đoán có thai sớm ở bò. Từ khóa: Horse Radish Peroxydase-Progesterone, chẩn đoán có thai sớm ở bò ĐẶT VẤN ĐỀ* Động thái của hormone progesterone (P4) có trong huyết thanh (hoặc trong sữa) là tín hiệu quan trọng phản ánh tình trạng hoạt động của buồng trứng, tình trạng mang thai của con vật cũng nhƣ tín hiệu trong một số bệnh sinh sản. Việc xác định hàm lƣợng hormone P4 trong huyết thanh (hoặc sữa) có thể nhanh chóng giúp chẩn đoán nguyên nhân chậm sinh cũng nhƣ có thai sớm với thời gian nhanh, chính xác, hạn chế những tác động không có lợi từ khám thai trực tiếp qua trực tràng đối với cơ thể con mẹ và bào thai. Để thực hiện phản ứng ELISSA định lƣợng hàm lƣợng P4 cần phải có Kit Enzyme Immuno Assay-Progesterone (EIA-P4) với các thành phần chính là: Kháng thể kháng P4 và HRP-P4. Hiện tại .