tailieunhanh - Biểu hiện và tinh sạch listeriolysin O của Listeria monocytogenes mang hai đột biến điểm E247M và D320K trong Bacillus subtilis

Nghiên cứu này nhằm biểu hiện LLO đột biến E247M và D320K trên hệ thống Bacillus subtilis nhằm thu nhận LLOE247M và D320K có hoạt tính ở điều kiện pH trung tính. Nhằm tăng cường khả năng biểu hiện protein trong B. subtilis và dễ dàng thu nhận bằng phương pháp tinh chế qua cột sắc kí chứa ion Ni2+, gen mã hóa protein LLOE247M và D320K được dung hợp với trình tự đuôi LysSRN-6xHisTEVsite. | Science & Technology Development, Vol 19, 2016 Biểu hiện và tinh sạch listeriolysin O của Listeria monocytogenes mang hai đột biến điểm E247M và D320K trong Bacillus subtilis Ngô Khắc Huy Nguyễn Lê Tuấn Anh Huỳnh Thị Kim Phương Nguyễn Văn Phúc Trần Linh Thước Nguyễn Đức Hoàng Phan Thị Phượng Trang Trường Đại học Khoa học Tự nhiên, ĐHQG-HCM (Bài nhận ngày 17 tháng 07 năm 2015, nhận đăng ngày 20 tháng 08 năm 2016) TÓM TẮT Listeriolysin O (LLO) từ Listeria Nhằm tăng cường khả năng biểu hiện protein monocytogenes có chức năng phân hủy màng trong B. subtilis và dễ dàng thu nhận bằng phospholipid ở điều kiện pH thấp trong quá trình phương pháp tinh chế qua cột sắc kí chứa ion xâm nhiễm tế bào chủ. Yếu tố này có thể ứng Ni2+, gen mã hóa protein LLOE247M và D320K dụng trong việc phân phối tác chất vào trong mô được dung hợp với trình tự đuôi LysSRN-6xHisnếu như LLO hoạt động được ở điều kiện pH TEVsite. Kết quả đã tinh chế được protein tái tổ trung tính và không chứa độc tố trong quá trình hợp có độ tinh sạch cao và có hoạt tính tán huyết thu nhận LLO. Nghiên cứu này nhằm biểu hiện với 3 HU độc tố trong khoảng pH từ 5,0 đến 8,5. LLO đột biến E247M và D320K trên hệ thống Kết quả nghiên cứu này làm cơ sở cho các nghiên cứu ứng dụng tiếp theo. Bacillus subtilis nhằm thu nhận LLOE247M và D320K có hoạt tính ở điều kiện pH trung tính. Từ khóa: Listeriolysin O, E247M, D320K, Bacillus subtilis, Pgrac, pHT vectors system MỞ ĐẦU Listeria monocytogenes là một tác nhân gây bệnh có khả năng ký sinh nội bào một cách tùy ý. Để xâm nhiễm, tồn tại và nhân lên bên trong tế bào chủ, vi khuẩn cần sử dụng nhân tố độc lực quan trọng là listeriolysin O (LLO) [15]. Các chủng L. monocytogenes đột biến thiếu LLO (hlyA-) sẽ mất tính gây độc trên mô hình tế bào chuột [10]. Ngược lại, một số chủng vi khuẩn khác như Bacillus subtilis khi mang gen hlyA lại có hoạt tính tán huyết như L. monocytogenes hoang dại [2]. LLO là một thành viên trong họ Trang 20 Cholesterol Dependent .