tailieunhanh - Cải thiện mức độ biểu hiện kháng nguyên tái tổ hợp 3-1E của Eimeria trong Escherichia coli BL21 (DE3)

Nội dung của nghiên cứu nhằm cải thiện mức độ biểu hiện kháng nguyên tái tổ hợp 3-1E trong tế bào E. coli chủng BL21 (DE3) mang gen kháng nguyên 3-1E của cầu trùng Eimeria. Để nắm nội dung . | KHOA HỌC KỸ THUẬT THÚ Y TẬP XXIII SỐ 2 - 2016 CAÛI THIEÄN MÖÙC ÑOÄ BIEÅU HIEÄN KHAÙNG NGUYEÂN TAÙI TOÅ HÔÏP 3-1E CUÛA EIMERIA TRONG ESCHERICHIA COLI BL21 (DE3) Đinh Thị Bích Lân1, Phùng Thăng Long2, Huỳnh Văn Chương1, Đặng Thanh Long1, Hoàng Tấn Quảng1, Lê Đức Thạo1, Lê Quốc Việt1, Lê Công Thịnh1, Đặng Thị Hương1, Hoàng Thị Thùy Nhung1 TÓM TẮT Chúng tôi đã tiến hành nghiên cứu này nhằm cải thiện mức độ biểu hiện kháng nguyên tái tổ hợp 3-1E trong tế bào E. coli chủng BL21 (DE3) mang gen kháng nguyên 3-1E của cầu trùng Eimeria. Kết quả nghiên cứu cho thấy môi trường nuôi cấy LB cho khả năng sinh trưởng tốt nhất của chủng E. coli BL21 (DE3) với tỷ lệ tiếp giống 2% (OD600 = 0,8), lắc 200 vòng/phút ở 37ºC sau 11 giờ nuôi cấy. Tuy nhiên, mức độ biểu hiện của protein dung hợp 6xHis-3-1E lại cho kết quả tốt nhất trên môi trường YJ trong cùng một điều kiện tối ưu (nồng độ chất cảm ứng IPTG là 0,8 mM, nuôi lắc ở 200 vòng/phút, nhiệt độ cảm ứng 20ºC trong thời gian 10 giờ). Sắc ký lọc gel 6xHis cho thấy sản phẩm protein dung hợp 6xHis-3-1E có khối lượng phân tử vào khoảng 26 kDa. Từ khóa: Protein dung hợp, E. coli BL21 (DE3), 3-1E, Eimeria Enhancing expression level of recombinant antigen 3-1E of Eimeria in Escherichia coli BL21 (DE3) Dinh Thi Bich Lan, Phung Thang Long, Huynh Van Chuong, Dang Thanh Long, Hoang Tan Quang, Le Duc Thao, Le Quoc Viet, Le Cong Thinh, Dang Thi Huong, Hoang Thi Thuy Nhung SUMMARY Improvement of the recombinant antigen expression level in E. coli strain BL21 StarTM(DE3) encoding gene 3-1E of Eimeria was conducted. The studied result showed that LB medium has given the best growth of E. coli BL21 (DE3) in comparison with other media in the same 2 % initial seed inoculum size (OD600 = 0,8), shaking 200 rpm at 370C for 11 hrs. However, the highest level of fusion protein (6xHis-3-1E) was obtained from YJ medium in the same optimum culture condition ( mM IPGT-Isopropyl β-D-1-thiogalactopyranoside for 10hrs. at 20oC). Molecular weight .