tailieunhanh - Nghiên cứu xây dựng phương pháp định lượng kháng thể IgY kháng vi khuẩn tả (Vibrio cholera) và độc tố tả còn hoạt tính bằng ELISA

Mục tiêu nghiên cứu của bài viết nhằm xây dựng phương pháp định lượng kháng thể IgY kháng vi khuẩn tả và độc tố tả còn hoạt tính bằng phương pháp ELISA nhằm làm cơ sở cho đánh giá chất lượng kháng thể và bào chế chế phẩm dùng đường uống từ nguồn nguyên liệu này. | T¹p chÝ y - d−îc häc qu©n sù sè chuyªn ®Ò d¦îC-2016 NGHIÊN CỨU XÂY DỰNG PHƯƠNG PHÁP ĐỊNH LƯỢNG KHÁNG THỂ IgY KHÁNG VI KHUẨN TẢ (Vibrio cholera) VÀ ĐỘC TỐ TẢ CÒN HOẠT TÍNH BẰNG ELISA Phạm Văn Hiển*; Vũ Bình Dương*; Ngô Xuân Trình* Hồ Bá Ngọc Minh*; Ngô Thị Tuyết Mai*; Nguyễn Thị Hồng Thanh** TÓM TẮT Mục tiêu: xây dựng phương pháp định lượng kháng thể IgY kháng vi khuẩn (VK) tả và độc tố tả còn hoạt tính. Đối tượng: kháng thể IgY kháng VK tả và kháng độc tố tả được sản xuất tại Học viện Quân y. Phương pháp: thẩm định theo Hướng dẫn của ICH, Bộ Y tế Việt Nam. Kết quả: xác định được điều kiện phân tích bằng phương pháp ELISA nhờ phản ứng tạo màu của phức hợp kháng thể - HRP với cromogen đo ở bước sóng 450 nm. Phương pháp đã được thẩm định, bảo đảm yêu cầu của phương pháp phân tích gồm tính đặc hiệu, khoảng tuyến tính, độ đúng, độ chính xác, giới hạn định lượng (LOQ) và giới hạn phát hiện (LOD). Kết luận: đã xây dựng và thẩm định được phương pháp định lượng kháng thể IgY kháng VK tả và độc tố tả còn hoạt tính bằng phương pháp ELISA. * Từ khóa: Vi khuẩn tả; Kháng thể IgY kháng vi khuẩn tả; Kháng thể IgY kháng độc tố tả; ELISA. Determination of Activation of Anti-vibrio Cholera and Anti-vibrio Cholera Toxin IgY by ELISA Method Summary Objectives: Establishment and validation of IgY anti-vibrio and anti-vibrio toxin by ELISA. Materials: IgY anti-vibrio and IgY anti-vibrio toxin were prepared at Vietnam Military Medical University. Methods: Using ELISA method based on colourimetry of complex IgY-HRP-cromogen at 450 nm. The validation was carried out in accordance with ICH and Vietnam Ministry of Health guideline. Results: The quantification method of IgY anti-vibrio cholera and anti-vibrio cholera toxin was established and validated completing of selectivity, linerity, presison, accuracy, LOD and LOQ. Conclusions: The quantification method of IgY anti-vibrio cholera and anti-vibrio cholera toxin was validated fully in accordance with ICH and Vietnam Ministry of Health. *