tailieunhanh - Tổng hợp và kiểm chứng tính sinh miễn dịch của Epitope tế bào B được dự đoán bằng phương pháp tin sinh học từ kháng nguyên HA của virus cúm A/H5N1
Nhằm phát triển vaccine có hiệu lực ổn định đối với virus dễ biến đổi như virus cúm A/H5N1, chúng tôi sử dụng công cụ tin sinh học để dự đoán các epitope bảo tồn từ các kháng nguyên của virus dùng làm vật liệu để phát triển vaccine đa giá phòng chủng virus cúm này. Với cách tiếp cận này, chúng tôi đã dự đoán được một epitope tế bào B là một peptide gồm 21 axít amin liên tục trên vùng bảo tồn của kháng nguyên HA của virus cúm A/H5N1. Để kiểm chứng tính sinh miễn dịch của epitope này, chúng tôi sử dụng kỹ thuật tái tổ hợp gen để tổng hợp trong tế bào E. coli epitope tái tổ hợp ở dạng dung hợp với kháng nguyên roi H:1,2 của Salmonella Typhimurium và glutathione S-transferase. Kháng nguyên tái tổ hợp này được thu nhận, tinh chế và được dùng làm kháng nguyên để gây đáp ứng miễn dịch ở chuột. Bằng phương pháp ELISA, chúng tôi đã chứng minh được rằng kháng huyết thanh thu nhận được từ chuột này có khả năng nhận diện và gắn đặc hiệu với kháng nguyên HA của chủng virus cúm H5N1 đã được phân lập từ bệnh phẩm gà tại Việt Nam tương tự như kháng thể từ chuột tiêm vaccine bất hoạt thương mại phòng chống virus H5N1 dùng cho gia cầm. | TAÏP CHÍ PHAÙT TRIEÅN KH&CN, TAÄP 15, SOÁ T3- 2012 TỔNG HỢP VÀ KIỂM CHỨNG TÍNH SINH MIỄN DỊCH CỦA EPITOPE TẾ BÀO B ðƯỢC DỰ ðOÁN BẰNG PHƯƠNG PHÁP TIN SINH HỌC TỪ KHÁNG NGUYÊN HA CỦA VIRUS CÚM A/H5N1 Trần Thị Hồng Kim, Trần Thị Như Thùy, Trần Linh Thước Trường ðại học Khoa học Tự nhiên, ðHQG-HCM (Bài nhận ngày 21 tháng 06 năm 2012, hoàn chỉnh sửa chữa ngày 06 tháng 11 năm 2012) TÓM TẮT: Nhằm phát triển vaccine có hiệu lực ổn ñịnh ñối với virus dễ biến ñổi như virus cúm A/H5N1, chúng tôi sử dụng công cụ tin sinh học ñể dự ñoán các epitope bảo tồn từ các kháng nguyên của virus dùng làm vật liệu ñể phát triển vaccine ña giá phòng chủng virus cúm này. Với cách tiếp cận này, chúng tôi ñã dự ñoán ñược một epitope tế bào B là một peptide gồm 21 axít amin liên tục trên vùng bảo tồn của kháng nguyên HA của virus cúm A/H5N1. ðể kiểm chứng tính sinh miễn dịch của epitope này, chúng tôi sử dụng kỹ thuật tái tổ hợp gen ñể tổng hợp trong tế bào E. coli epitope tái tổ hợp ở dạng dung hợp với kháng nguyên roi H:1,2 của Salmonella Typhimurium và glutathione Stransferase. Kháng nguyên tái tổ hợp này ñược thu nhận, tinh chế và ñược dùng làm kháng nguyên ñể gây ñáp ứng miễn dịch ở chuột. Bằng phương pháp ELISA, chúng tôi ñã chứng minh ñược rằng kháng huyết thanh thu nhận ñược từ chuột này có khả năng nhận diện và gắn ñặc hiệu với kháng nguyên HA của chủng virus cúm H5N1 ñã ñược phân lập từ bệnh phẩm gà tại Việt Nam tương tự như kháng thể từ chuột tiêm vaccine bất hoạt thương mại phòng chống virus H5N1 dùng cho gia cầm. Từ khóa: epitope tế bào B, tạo dòng, biểu hiện, ELISA, virus cúm A/H5N1. MỞ ðẦU vaccine hiện có, khắc phục vấn ñề hàng năm Dịch cúm A/H5N1 là một bệnh dịch có khả phải tạo vaccine mới cho các chủng virus cúm năng lây lan rộng và gây thiệt hại nghiêm trọng mới, ñồng thời nhằm nghiên cứu tạo ra một ở gia cầm cũng như ảnh hưởng ñến sức khỏe loại vaccine ña trị có khả năng phòng ngừa con người. Cho ñến nay, nhiều phương pháp ñược nhiều chủng virus cúm khác nhau [1,
đang nạp các trang xem trước
