tailieunhanh - Cấu trúc chủng nấm men Pichia pastoris biểu hiện mini-proinsulin dạng tiết ra môi trường nuôi cấy

Đái tháo đường là một trong những căn bệnh đang rất được quan tâm hiện nay. Nhằm mục đích sản xuất insulin tái tổ hợp phục vụ điều trị bệnh đái tháo đường, chúng tôi dòng hóa và biểu hiện miniproinsulin trong Pichia pastoris. Đoạn DNA mang gen mã hóa miniproinsulin-6xHis (MPI-6xHis) được dòng hóa vào vector pPICZαA tạo plasmid pPICZαA/h-mpi để cấu trúc chủng P. pastoris GS115::h-mpi biểu hiện MPI tái tổ hợp dạng tiết ra ngoài môi trường. Kiểu hình và kiểu gen của P. pastoris GS115::h-mpi được xác định bằng PCR và cắt hạn chế. MPI được biểu hiện ở dạng dung hợp với thể 6xHis khi cảm ứng với methanol với nồng độ cuối cùng 0,5% sau 96 giờ. | TAÏP CHÍ PHAÙT TRIEÅN KH&CN, TAÄP 15, SOÁ T1 2012 C4U TRÚC CH NG N4M MEN PICHIA PASTORIS BIc Trư ng Đ i h c Khoa h c T nhiên, ĐHQG-HCM (Bài nh n ngày 21 tháng 03 năm 2011, hoàn ch nh s a ch a ngày 09 tháng 04 năm 2012) TÓM T T: Đái tháo ñư ng là m t trong nh ng căn b nh ñang r t ñư c quan tâm hi n nay. Nh m m c ñích s n xu t insulin tái t h p ph c v ñi u tr b nh ñái tháo ñư ng, chúng tôi dòng hóa và bi u hi n miniproinsulin trong Pichia pastoris. Đo n DNA mang gen mã hóa miniproinsulin-6xHis (MPI-6xHis) ñư c dòng hóa vào vector pPICZαA t o plasmid pPICZαA/h-mpi ñ c u trúc ch ng P. pastoris GS115::h-mpi bi u hi n MPI tái t h p d ng ti t ra ngoài môi trư ng. Ki u hình và ki u gen c a P. pastoris GS115::h-mpi ñư c xác ñ nh b ng PCR và c,t h n ch . MPI ñư c bi u hi n * d ng dung h p v i th 6xHis khi c m ng v i methanol v i n$ng ñ cu i cùng 0,5% sau 96 gi . T khóa: bi u hi n gen, Pichia pastoris, mini-proinsulin. M Đ(U tính. G$n ñây, mô hình mini-proinsulin (MPI) Đái tháo ñư ng (ĐTĐ) là m t trong nh ng ñã ñư c nghiên c u v i nhi u ưu ñi m. Mini- căn b nh ñang ñư c quan tâm hàng ñ$u hi n proinsulin có c u trúc tương t v i proinsulin, nay. B nh ĐTĐ, chi m kho ng 60-70% trong ch khác là có c i ti n thay th ño n peptide các b nh n i ti t, là nguyên nhân gây t vong ñ$u carboxyl (ñ$u C) t nhiên 31 amino acid ñ ng hàng th năm " các nư c phát tri n và trong proinsulin b ng m t ño n peptide ng n ñang tăng ñ t bi n " nhi u nư c ñang phát hơn (9 amino acid), giúp d# dàng cho vi c tinh tri n, các nư c công nghi p m i. Hàng năm ch và gia tăng hi u qu g p cu n d0n ñ n tăng trên th gi i có kho ng 3,2 tri u ngư i ch t vì hi u su t hình thành insulin có ho t tính hơn b nh ĐTĐ [4]. Ngày nay, vi c s d ng insulin mô hình proinsulin. Đo n peptide C ng n hơn ñư c xem là m t ph$n không th thi u ñ i v i làm tăng kh năng g p cu n lên 20-40% so v i b nh nhân m c b nh ĐTĐ, ñ c bi t là ĐTĐ týp proinsulin " cùng n%ng ñ [1]. 1 [6]. Vì th , vi c s n xu t insulin ngư i b .

TỪ KHÓA LIÊN QUAN
crossorigin="anonymous">
Đã phát hiện trình chặn quảng cáo AdBlock
Trang web này phụ thuộc vào doanh thu từ số lần hiển thị quảng cáo để tồn tại. Vui lòng tắt trình chặn quảng cáo của bạn hoặc tạm dừng tính năng chặn quảng cáo cho trang web này.