tailieunhanh - Sàng lọc, thu nhận và khảo sát hoạt tính Lipase từ Bacillus

Nghiên cứu với mục tiêu chọn lọc chủng Bacillus có khả năng sinh tổng hợp lipase cao; từ 10 chủng Bacillus, chúng tôi chọn được chủng Bacillus subtilis OII (BS7) sinh lipase cao nhất ở pH = 7,0; nồng độ cơ chất 1,2% sau 3 ngày nuôi cấy. Chế phẩm lipase thu nhận được có pHopt 10,0; topt 60oC. Ion Mg2+, Ca2+ là hai ion giữ hoạt tính; ion bất hoạt là Zn2+, Cu2+; SDS 0,2% làm giảm 95% hoạt tính lipase. Chúng tôi tinh sạch được lipase của BS7 có trọng lượng phân tử khoảng 23,8 kDa. Những kết quả trên là cơ sở cho việc tạo ra lipase tái tổ hợp từ Bacillus subtilis OII. | Science & Technology Development, Vol 14, 2011 SÀNG LỌC, THU NHẬN VÀ KHẢO SÁT HOẠT TÍNH LIPASE TỪ BACILLUS Trần ðăng Khoa, Lê Quang Huy, Ngô ðại Nghiệp Trường ðại học Khoa học Tự nhiên, ðHQG-HCM (Bài nhận ngày 21 tháng 03 năm 2011, hoàn chỉnh sửa chữa ngày 18 tháng 11 năm 2011) TÓM TẮT: Nghiên cứu với mục tiêu chọn lọc chủng Bacillus có khả năng sinh tổng hợp lipase cao; từ 10 chủng Bacillus, chúng tôi chọn ñược chủng Bacillus subtilis OII (BS7) sinh lipase cao nhất ở pH = 7,0; nồng ñộ cơ chất 1,2% sau 3 ngày nuôi cấy. Chế phẩm lipase thu nhận ñược có pHopt 10,0; topt 60oC. Ion Mg2+, Ca2+ là hai ion giữ hoạt tính; ion bất hoạt là Zn2+, Cu2+; SDS 0,2% làm giảm 95% hoạt tính lipase. Chúng tôi tinh sạch ñược lipase của BS7 có trọng lượng phân tử khoảng 23,8 kDa. Những kết quả trên là cơ sở cho việc tạo ra lipase tái tổ hợp từ Bacillus subtilis OII. Từ khóa: Bacillus, lipase, tinh sạch. GIỚI THIỆU Lipase (EC ) thuộc nhóm phụ enzyme học, nhiên liệu sinh học, xử lý môi trường và các chế phẩm sinh học khác [8]. thủy phân có serine ở trung tâm hoạt ñộng của Lipase có thể thu nhận từ nhiều nguồn khác tổng họ thủy phân α/β, xúc tác cho nhiều phản nhau như ñộng vật, thực vật hay vi sinh vật. ứng khác nhau: thủy phân các liên kết Nguồn thu nhận từ vi sinh vật ñược quan tâm carboxylester trong glyceride, chuyển ester nhiều nhất do ñiều kiện sản xuất, thu nhận dễ hóa. Trong môi trường khan nước lipase có khả dàng. Các vi sinh vật thường ñược sử dụng như năng ester hóa rượu, ñường, thiol và amin tạo Rhizopus, Pseudomonas, Candida, Aspergillus, những ester có cấu trúc lập thể ñặc trưng [4, Bacillus [4] 10]. Ngoài ra, lipase hiện diện rộng rãi và tham Sử dụng enzyme trong các ngành công gia vào sự chuyển hóa sinh học của lipid trong nghiệp, y dược, ñang là xu hướng chung của tự nhiên. cả thế giới. Ở nước ta, enzyme chủ yếu ñược Trong những năm gần ñây, lipase giữ một vị nhập khẩu từ nước ngoài với chi phí cao, trong trí quan trọng trên thị