tailieunhanh - Tạo vector biểu hiện chứa cấu trúc microRNA nhân tạo nhằm bất hoạt gene tuyến trùng Meloidogyne incognita

Các effector được phát hiện có vai trò quan trọng trong tính ký sinh của tuyến trùng gây hại thực vật. Các phương pháp làm câm lặng các gene mã hóa effector đang được quan tâm nghiên cứu và hứa hẹn là công cụ hữu hiệu tạo giống cây trồng kháng tuyến trùng ký sinh thực vật. Trong nghiên cứu này, gene Minc17980 mã hóa cho một effector chưa rõ chức năng được tạo dòng từ tuyến trùng Meloidogyne incognita ký sinh đậu nành. | 48 TẠO VECTOR BIỂU HIỆN CHỨA CẤU TRÚC microRNA NHÂN TẠO NHẰM BẤT HOẠT GENE TUYẾN TRÙNG Meloidogyne incognita CONSTRUCTION OF AN ARTIFICIAL microRNA EXPRESSION VECTOR FOR SILENCING A GENE OF Meloidogyne incognita Nguyễn Vũ Phong Trường Đại học Nông Lâm Tp. Hồ Chí Minh Email: nvphong@ TÓM TẮT Các effector được phát hiện có vai trò quan trọng trong tính ký sinh của tuyến trùng gây hại thực vật. Các phương pháp làm câm lặng các gene mã hóa effector đang được quan tâm nghiên cứu và hứa hẹn là công cụ hữu hiệu tạo giống cây trồng kháng tuyến trùng ký sinh thực vật. Trong nghiên cứu này, gene Minc17980 mã hóa cho một effector chưa rõ chức năng được tạo dòng từ tuyến trùng Meloidogyne incognita ký sinh đậu nành. Trình tự của gene này có sự tương đồng 97% với mẫu hiện diện trên GenBank (ID: ). Từ đó, hai cấu trúc microRNA nhân tạo có khả năng bất hoạt gene này được tổng hợp nhờ vào precursor miR319a của Arabidopsis thaliana. Các miRNA nhân tạo được gắn vào vector biểu hiện ở cây đậu nành nhằm tìm hiểu vai trò của effector MINC17980 trong khả năng ký sinh thực vật của tuyến trùng sưng rễ thông qua con đường làm câm lặng gene bởi cây chủ (HIGS). Từ khóa: câm lặng gene, effector, Meloidogyne, microRNA, tuyến trùng ký sinh thực vật. ABSTRACT Effectors were found to play important roles in parasitism of plant-parasitic nematode. Gene silencing is one of the most studied strategies and is promising to be as an effective tool for producing plant varieties that are resistant to parasitic nematodes. In this study, the sequence of Minc17980 gene, encoding for a pioneer effector with unknown function, was cloned from a Meloidogyne incognita isolate. The nucleotide sequence of this gene showed 97% identity to its homolog in GenBank (ID: ) used as the control strain in our research. To generate a construct that can potentially knock-down the expression of Minc17980 gene, two artificial microRNAs were synthesized based on the miR319a structure of .