tailieunhanh - Phân lập và biểu hiện đoạn gen mã hóa Polypeptit giàu tính kháng nguyên trên Protein vỏ p10 của Virus gây bệnh lúa lùn Sọc Đen
Bài viết Phân lập và biểu hiện đoạn gen mã hóa Polypeptit giàu tính kháng nguyên trên Protein vỏ p10 của Virus gây bệnh lúa lùn Sọc Đen trình bày virus gây bệnh lúa lùn sọc đen (Southern rice black-streaked dwarf virus - SRBSDV) là một virus mới, thuộc Fijivirus, họ Reovidae; gây dịch bệnh nghiêm trọng trên lúa với diện tích hàng chục triệu hecta tại các vùng trồng lúa ở phía Nam Trung Quốc và miền Bắc, Trung Việt Nam vào năm 2009 - 2010,. . | J. Sci. & Devel. 2015, Vol. 13, No. 7: 1153-1161 Tạp chí Khoa học và Phát triển 2015, tập 13, số 7: 1153-1161 PHÂN LẬP VÀ BIỂU HIỆN ĐOẠN GEN MÃ HÓA POLYPEPTIT GIÀU TÍNH KHÁNG NGUYÊN TRÊN PROTEIN VỎ P10 CỦA VIRUS GÂY BỆNH LÚA LÙN SỌC ĐEN Đỗ Thị Hạnh1, Phạm Thanh Tâm2, Phạm Xuân Hội2 1 Đại học Phương Đông, 2Viện Di truyền Nông nghiệp Email: dohanhcnsh@ Ngày gửi bài: Ngày chấp nhận: TÓM TẮT Virus gây bệnh lúa lùn sọc đen (Southern rice black-streaked dwarf virus - SRBSDV) là một virus mới, thuộc Fijivirus, họ Reovidae; gây dịch bệnh nghiêm trọng trên lúa với diện tích hàng chục triệu hecta tại các vùng trồng lúa ở phía Nam Trung Quốc và miền Bắc, Trung Việt Nam vào năm 2009 - 2010. Để tạo ra kháng thể đặc hiệu SRBSDV phục vụ chẩn đoán bằng kỹ thuật ELISA, đoạn gen mã hóa polypeptit giàu tính kháng nguyên trên phân đoạn S10 của virus SRBSDV đã được phân lập và biểu hiện trong vi khuẩn E. coli. Đoạn gen có kích thước 525bp được nhân dòng vào vector pGEM®-T, sau đó ghép nối vào vùng biểu hiện trên vector pET28a và biến nạp vào tế bào vi khuẩn E. coli chủng Rossetta để nuôi cấy biểu hiện polypeptit tái tổ hợp. Polypeptit dung hợp có gắn nhãn His được biểu hiện ở điều kiện nuôi cấy tế bào 37°C trong thời gian 16h, với nồng độ chất cảm ứng IPTG 1,0mM. Sử dụng cột sắc ký ái lực Ni-NTA, một polypeptit tái tổ hợp có kích thước khoảng 35kDa gồm polypeptit và hai đoạn polypeptit ở hai đầu 5’ và 3’ của vector pET28a đã được tinh sạch từ dịch chiết tế bào tổng số. Polypeptit tái tổ hợp tinh sạch sẽ được sử dụng làm nguồn vật liệu cho nghiên cứu tạo kháng thể đặc hiệu virus SRBSDV. Từ khóa: Polypeptit giàu tính kháng nguyên, , protein tái tổ hợp, SRBSDV, vector biểu hiện pET28a. Purification and Expression of DNA Segment Encoding Highly-Antigenic Polypeptide from Capsid Protein P10 of Southern Rice Black-Streaked Dwarf Virus ABSTRACT Southern rice black-streaked dwarf virus-SRBSDV is
đang nạp các trang xem trước
