tailieunhanh - Phá vỡ escherischia coli tái tổ hợp bằng Lysozym để phân tích các enzym được biểu hiện

Bài viết Phá vỡ escherischia coli tái tổ hợp bằng Lysozym để phân tích các enzym được biểu hiện trình bày việc thu thập protein tái tổ hợp sau khi biến nạp vào Escherichia coli, nhất là những protein có hoạt tính enzym, đòi hỏi một phương pháp phá vỡ tế bào hợp lý để hoạt tính enzym được bảo toàn. Nghiên cứu nhằm sử dụng lysozim để phá vỡ Escherichia coli,. . | TẠP CHÍ NGHIÊN CỨU Y HỌC PHÁ VỠ ESCHERISCHIA COLI TÁI TỔ HỢP BẰNG LYSOZYM ĐỂ PHÂN TÍCH CÁC ENZYM ĐƯỢC BIỂU HIỆN Lê Thị Kim Tuyến1, Bạch Khánh Hòa2 1 Trường Đại học Thăng Long, 2Trường Đại học Y Hà Nội Việc thu thập protein tái tổ hợp sau khi biến nạp vào Escherichia coli, nhất là những protein có hoạt tính enzym, đòi hỏi một phương pháp phá vỡ tế bào hợp lý để hoạt tính enzym được bảo toàn. Nghiên cứu nhằm sử dụng lysozim để phá vỡ Escherichia coli. Phương pháp nghiên cứu: chủng tế bào ER 3081 được biến nạp với pSAPV6 tái tổ hợp chứa gen enzim hạn chế của chủng Rothia dendocariosa ATCC 17931. Lysozim được dùng để phá vỡ tế bào ở các điều kiện thí nghiệm khác nhau và đồng thời hoạt tính enzym hạn chế được kiểm tra. Kết quả cho thấy phương pháp sử dụng lysozim để phá vỡ vi khuẩn cho phép thu thập enzim hạn chế tái tổ hợp giữ hoạt tính cao. Từ khóa: Phá vỡ tế bào - Escherichia coli, protein tái tổ hợp, nguyên sinh chất, lysozim I. ĐẶT VẤN ĐỀ không quá 40°C hoặc một số hóa chất thích được sử dụng khi nghiên cứu các thành phần hợp. Những phương pháp thường được dùng như siêu âm, nghiền nát, áp lực cao đã được của sinh tổng hợp tế bào. Gần đây, với sự phát triển ngành sinh học phân tử, vi khuẩn này còn nhiều tác giả nghiên cứu so sánh với nhau [1]. Việc dùng máy móc thường tạo ra hiệu lực rất được dùng làm tế bào chủ cho các plasmit tái tổ hợp trong phương pháp clon gen. Phương cao để vỡ màng tế bào nhưng cũng ảnh Trong lịch sử, Escherichia coli thường pháp này rất cần thiết cho việc sản xuất các loại protein ứng dụng trong nghiên cứu và hưởng không ít đến sự nguyên vẹn của các protein được giải phóng. Mặt khác, các vách nhiều lĩnh vực của đời sống xã hội [2]. Việc tế bào vi khuẩn chứa một lớp peptidoglycan và lysozim là một enzim có chức năng phân nghiên cứu các protein trong nguyên sinh chất của Escherichia coli đòi hỏi trải qua giai đoạn hủy đặc hiệu peptidoglycan, do vậy nó có vai trò làm phá vỡ các vi khuẩn. Tuy nhiên, pepti- phá vỡ tế bào vi .