tailieunhanh - Nghiên cứu một số yếu tố ảnh hưởng đến phản ứng PCR phát hiện nhanh vi khuẩn salmonella spp. gây ngộ độc thực phẩm

Trong nghiên cứu này, chúng tôi nghiên cứu một số yếu tố ảnh hưởng đến phản ứng PCR (Polymerase Chain Reaction) nhằm phát hiện nhanh Salmonella spp. so với các kỹ thuật sinh hóa truyền thống. Bộ genome của Salmonell spp. được thu nhận từ phương pháp dung dịch tách chiết (I, II, III, IV). Trình tự gen độc tố (enterotoxin) được khuếch đại bằng kỹ thuật PCR với các cặp mồi đặc hiệu khác nhau như UNI_O, UNI_I, InvA_fr, InvA_12. | NGHIÊN CỨU MỘT SỐ YẾU TỐ ẢNH HƯỞNG ĐẾN PHẢN ỨNG PCR PHÁT HIỆN NHANH VI KHUẨN SALMONELLA SPP. GÂY NGỘ ĐỘC THỰC PHẨM Trần Hoàng Ngâu, Nguyễn Bá Thọ, Phạm Văn Quan Trường Đại học Công nghiệp Thực phẩm Ngày gửi bài: 09/5/2016 Ngày chấp nhận đăng: 30/5/2016 TÓM TẮT Salmonella spp. là vi khuẩn có khả năng nhiễm vào bất cứ công đoạn nào của quá trình chế biến và bảo quản thực phẩm, nhất là thực phẩm tươi sống. Trong nghiên cứu này, chúng tôi nghiên cứu một số yếu tố ảnh hưởng đến phản ứng PCR (Polymerase Chain Reaction) nhằm phát hiện nhanh Salmonella spp. so với các kỹ thuật sinh hóa truyền thống. Bộ genome của Salmonell spp. được thu nhận từ phương pháp dung dịch tách chiết (I, II, III, IV). Trình tự gen độc tố (enterotoxin) được khuếch đại bằng kỹ thuật PCR với các cặp mồi đặc hiệu khác nhau như UNI_O, UNI_I, InvA_fr, InvA_12. Nồng độ tối ưu của thành phần tham gia trong phản ứng PCR là dNTPs và enzyme Taq Polymerase đều là để cho band DNA rõ nhất. Kết quả này giúp hoàn thiện bước đầu việc nghiên cứu sản xuất bộ kit PCR thương mại phát hiện nhanh Salmonella spp. trong khoảng thời gian 3-5 giờ có ý nghĩa trong an toàn thực phẩm. Từ khóa: Gen độc tố, Salmonella spp., InvA gene, bộ kit PCR STUDY OF INFLUENTIAL ELEMENTS IN POLYMERASE CHAIN REACTION (PCR) TO DIAGNOGIS SALMONELLA SPP. FROM FOODING POISONING ABSTRACT Salmonella spp. bacteria is able to infect at any stage of processing and preserving food, especially fresh food. In this study, we invesgated influential elements in PCR test in order to identify fast Salmonella spp. compared to traditionally biochemistry techniques. Salmonella genome is extracted from isolation chemical compounds set (I, II, III, IV). Enterotoxin genes isolated from its are amplified by PCR technique with many differently specifical primers, such as: UNI_O, UNI_I, InvA_fr, InvA_12. Optimal concentration of dNTPs and Taq Polymerase is to discover clear and bright DNA bands. This study helping to produce PCR kits market is .