tailieunhanh - Tách chiết, tinh sạch ADN từ các mẫu bị phân hủy trong thực nghiệm

Bài viết nghiên cứu tiến hành trên 16 mẫu máu không bảo quản được xử lý ở nhiệt độ phòng trong các khoảng thời gian 2 tuần, 4 tuần, 8 tuần và 16 tuần, hoặc đun ở 1000C. Tiến hành tách chiết ADN bằng hạt từ tính, nhân gen GADPH, điện di kiểm tra sản phẩm PCR. | TẠP CHÍ Y - DƢỢC HỌC QUÂN SỰ SỐ 9-2013 TÁCH CHIẾT, TINH SẠCH ADN TỪ CÁC MẪU BỊ PHÂN HỦY TRONG THỰC NGHIỆM Trần Văn Khoa*; Triệu Tiến Sang* Nguyễn Minh Hải**; Ngô Trường Giang* TÓM TẮT Nghiên cứu tiến hành trên 16 mẫu máu không bảo quản được xử lý ở nhiệt độ phòng trong các khoảng thời gian 2 tuần, 4 tuần, 8 tuần và 16 tuần, hoặc đun ở 1000C. Tiến hành tách chiết ADN bằng hạt từ tính, nhân gen GADPH, điện di kiểm tra sản phẩm PCR. Kết quả: các phản ứng PCR cho sản phẩm đặc trưng. Như vậy, tách chiết ADN bằng hạt từ tính, các mẫu ADN bị biến tính một phần có đủ chất lượng ổn định, đủ điều kiện để có thể tiến hành các phân tích tiếp theo. * Từ khoá: Nhận dạng cá thể; Mini STRs; Tách triết, tinh sạch ADN. DNA EXTRACTION AND PURIFICATION FROM EXPERIMENTALLY DEGRADED SAMPLES SUMMARY The study was carried out on 16 blood samples, which were not preserved for different period of time: 2 weeks, 8 weeks and 16 weeks in condition of 370C temperature with 100% humidity, and in boiling water for 30 minutes, 2 hours, 4 hours and 5 hours. DNA was extracted using both normal kit and magnetic particle based DNA IQ, Promega kit. DNA samples were evaluated using Nano Drop 1000. DNA amplification for mini STR analysis was conducted using PowerPlex S5, Promega, USA. Results: all mini STR markers were successfully amplified and informative thus it can be used for individual identification in case of samples partially degraded. * Key words: Individual identification; Mini-STRs; DNA extraction and purification. ĐẶT VẤN ĐỀ Trong lĩnh vực ADN pháp y, nhiều trường hợp mẫu bị biến tính sau một thời gian nhất định hoặc bị biến tính do các tác nhân lý hóa khác nhau [3, 4]. Chính vì vậy, việc tách chiết ADN đóng vai trò quan trọng để thu được mẫu ADN * Học viện Quân y ** Viện Y học Hàng không Người phản hồi (Corresponding): Trần Văn Khoa (tranvankhoa@) Ngày nhận bài: 8/10/2013; Ngày phản biện đánh giá bài báo: 30/10/2013 Ngày bài báo được đăng: 7/11/2013 68 TẠP CHÍ Y - DƢỢC HỌC .