tailieunhanh - Bất thường nhiễm sắc thể ở tế bào máu dây rốn trẻ sơ sinh phơi nhiễm asen trước sinh

Bài viết này nghiên cứu tiến hành trên 58 mẫu máu cuống rốn trẻ sơ sinh được xác định phơi nhiễm asen trước sinh. Mẫu máu được nuôi cấy bạch cầu lympho trong 72 giờ, làm tiêu bản nhiễm sắc thể (NST) và vi nhân, nhuộm Giemsa và phân tích. | TẠP CHÍ Y - DƢỢC HỌC QUÂN SỰ SỐ 2-2014 - KẾT QUẢ NGHIÊN CỨU CHƢƠNG TRÌNH KHCN BẤT THƢỜNG NHIỄM SẮC THỂ Ở TẾ BÀO MÁU DÂY RỐN TRẺ SƠ SINH PHƠI NHIỄM ASEN TRƢỚC SINH Trần Văn Khoa*; Nguyễn Khắc Hải**; Ngô Trường Giang* Nguyễn Thị Thanh Nga*; Nguyễn Thị Việt Hà* TÓM TẮT Nghiên cứu tiến hành trên 58 mẫu máu cuống rốn trẻ sơ sinh được xác định phơi nhiễm asen trước sinh. Mẫu máu được nuôi cấy bạch cầu lympho trong 72 giờ, làm tiêu bản nhiễm sắc thể (NST) và vi nhân, nhuộm Giemsa và phân tích. Kết quả cho thấy, ở nhóm nghiên cứu tần số bất thường NST là 1,10% và tần số vi nhân 0,57%. Trong khi đó, ở nhóm chứng tần số này tương ứng là 0,56% và 0,11%. Ở trẻ sơ sinh phơi nhiễm asen trước sinh có tần số vi nhân bất thường NST ở tế bào bạch cầu máu cuống rốn cao hơn so với ở nhóm chứng (p 60 µg/l). Mẫu đối chứng được lựa chọn từ các thai phụ trong cùng khu vực, nhưng nồng độ asen nước tiểu thấp. Lấy mẫu máu lấy vào xylanh vô khuẩn, có chất chống đông heparin, vận chuyển trong vòng 24 giờ về Học viện Quân y trước khi nuôi cấy. 2. Phƣơng pháp nghiên cứu. * Nuôi cấy tế bào bạch cầu máu ngoại vi: Đối tượng nghiên cứu được lấy 2 ml máu tĩnh mạch, chống đông bằng heparin. 5 giọt máu toàn phần (0,5 ml) được nuôi cấy trong ống nuôi cấy ở tủ ấm 370C, 5% CO2 trong 72 giờ. Mỗi ống gồm 4 ml môi trường RPMI-1640 (Gibco), 1 ml huyết thanh bào thai B (Gibco), chất kích thích phân bào (PHA) 100 μl nồng độ 0,24 mg/ml, kháng sinh (antibiotic antimycotinic) 100X (Gifco). * Thu hoạch mẫu làm tiêu bản NST: Nhỏ 30 μl colcemid nồng độ 10 μg/ 1 ml/mẫu trước khi thu hoạch 45 phút. Thu hoạch mẫu, làm tiêu bản NST: ly tâm ống mẫu vòng/phút/10 phút, hút bỏ dịch nổi, nhược trương trong 7 ml dung dịch KCl 0,4%, cố định trong 5 ml dung dịch carnoy I:3 (3 methanol gốc/1 axít acetic) x 3 lần. Cuối cùng, ly tâm vòng/phút/10 phút, hút bỏ dịch nổi, giữ lại phần cặn lắng khoảng 200 - 250 µl để nhỏ từ 3 - 4 tiêu bản/mẫu, để khô tiêu bản, nhuộm Giemsa 10% trong đệm phosphat/6 - 8 phút. .