tailieunhanh - Nghiên cứu lựa chọn điều kiện biểu hiện kháng thể đơn chuỗi tái tổ hợp nhận biết kháng nguyên nhóm máu A trong chủng Escherichia coli

Kháng thể đơn chuỗi tái tổ hợp nhận biết đặc hiệu kháng nguyên nhóm máu A trong hệ ABO (antiA_scFv) đã được thiết kế biểu hiện trong Escherichia coli. Trong nghiên cứu này, chúng tôi khảo sát các điều kiện lên men nhằm tăng hiệu suất biểu hiện antiA_scFv đồng thời tiết kiệm chi phí và thời gian nuôi cấy. | CHI điều SINHkiện HOC Nghiên cứuTAP lựa chọn biểu2017, hiện 39(2): kháng 191-198 thể đơn DOI: NGHIÊN CỨU LỰA CHỌN ĐIỀU KIỆN BIỂU HIỆN KHÁNG THỂ ĐƠN CHUỖI TÁI TỔ HỢP NHẬN BIẾT KHÁNG NGUYÊN NHÓM MÁU A TRONG CHỦNG Escherichia coli Đặng Thị Ngọc Hà, Nguyễn Thị Trung, Lê Thị Thu Hồng, Đỗ Thị Huyền, Trương Nam Hải* Viện Công nghệ sinh học, Viện Hàn lâm KH & CN Việt Nam TÓM TẮT: Kháng thể đơn chuỗi tái tổ hợp nhận biết đặc hiệu kháng nguyên nhóm máu A trong hệ ABO (antiA_scFv) đã được thiết kế biểu hiện trong Escherichia coli. Trong nghiên cứu này, chúng tôi khảo sát các điều kiện lên men nhằm tăng hiệu suất biểu hiện antiA_scFv đồng thời tiết kiệm chi phí và thời gian nuôi cấy. Kết quả cho thấy, antiA_scFv được biểu hiện tốt nhất trong môi trường TB, ở nhiệt độ biểu hiện 30oC, nồng độ chất cảm ứng 0,1 mM IPTG và thời điểm cảm ứng khi tế bào ở giai đoạn sinh trưởng theo cấp số nhân có mật độ tế bào OD600 = 1,5. Với điều kiện lên men được lựa chọn, sinh khối tế bào thu được tăng gấp 5,2 lần (từ OD600 = 3,27 đến OD600 = 17,02) và năng suất thu hồi protein antiA_scFv tăng đáng kể so với điều kiện ban đầu trước khi tối ưu. Từ khóa: Escherichia coli, kháng thể đơn chuỗi tái tổ hợp, kháng nguyên nhóm máu A. MỞ ĐẦU Xác định nhóm máu hệ ABO hay Rh là công việc bắt buộc đối với người cho và nhận máu. Hiện nay, để xác định nhóm máu thường sử dụng huyết thanh mẫu. Đó là sản phẩm của việc nuôi cấy tế bào lai hay tách chiết máu của người tình nguyện theo cách truyền thống. Cách làm này rất tốn kém và không chủ động được nguồn nguyên liệu. Nhờ sự phát triển của công nghệ protein tái tổ hợp, việc tạo kháng thể đơn chuỗi đang ngày càng được phát triển. Kháng thể đơn chuỗi có kích thước nhỏ hơn phân tử kháng thể tự nhiên, ít gây kích ứng miễn dịch nên được ưu tiên sử dụng trong y tế và nghiên cứu. Kháng thể đơn chuỗi được ứng dụng rất nhiều trong chẩn đoán (Ahmad et al., 2012). Bên cạnh đó, kháng thể đơn chuỗi có thể được sử dụng cho mục đích điều chỉnh và