tailieunhanh - Culture and Cryopreservation of Rat Ventral Mesencephalic Stem Cells

Mục tiêu nghiên cứu của bài viết nhằm nuôi cấy tăng sinh và bảo quản lạnh thành công tế bào gốc ngoại bì thần kinh não giữa phôi chuột cống trắng để tạo nguồn nơ ron tiết dopamin. . | TẠP CHÍ Y - DƢỢC HỌC QUÂN SỰ SỐ CHUYÊN ĐỀ HÌNH THÁI HỌC-2017 Nguyễn Phúc Hoàn*; Nguyễn Thị Bình*; Nguyễn Mạnh Hà* TÓM TẮT Nghiên cứu được tiến hành nhằm nuôi cấy tăng sinh và bảo quản lạnh tế bào gốc não giữa phôi chuột cống trắng để tạo nguồn nơ ron tiết dopamin phục vụ điều trị bệnh Parkinson thực nghiệm. Các tế bào gốc sàn não giữa phôi chuột cống trắng 12,5 - 13,5 ngày tuổi được phân lập và nuôi cấy trong môi trường cơ bản (DMEM/F12; 1:1) có bổ sung b-FGF2, EGF và một số yếu tố tăng trưởng khác. Bảo quản lạnh các tế bào bằng môi trường cơ bản có bổ sung 10% DMSO. Sau 4 - 8 ngày nuôi cấy, thu được các nơ ron, tế bào sao, tế bào ít nhánh. Đa số tế bào này dương tính với marker vimentin và một số nơ ron dương tính với marker thyroxin hydroxylase (TH) khi nhuộm hóa mô miễn dịch. Tỷ lệ sống của tế bào sau bảo quản lạnh 64,9%. * Từ khoá: Tế bào gốc ngoại bì thần kinh não giữa; Nuôi cấy; Bảo quản lạnh. Culture and Cryopreservation of Rat Ventral Mesencephalic Stem Cells Summary The aim of this research was to culture and cryopreserve rat ventral mesencephalon cells to treat Parkinson’s diseases in rat. We have isolated rat ventral mesencephalic cells from rat embryonic days - , then cultured them in the basic medium culture composed of DMEM/F12; 1:1, supplemented with b-FGF2, EGF and growth factors. Then, harvest cells were cryopreserved in media with 10% DMSO. Neuron, astrocyte, oligocyte expressed after 4 - 8 days in in vitro culture, some of them were positive with vimentine, TH by immunohistochemistry staining. Survival cell rate after being frozen was 64,9%. * Keywords: Ventral mesencephalic stem cells; Culture; Cryopreservation. ĐẶT VẤN ĐỀ Trong những năm gần đây, có nhiều kỹ thuật mới đ và đang được ứng dụng trong tái tạo, sửa chữa hoặc thay thế mô hoặc cơ quan bị tổn thương. Một trong số đó là ứng dụng công nghệ tế bào gốc trong trị liệu. Thực tế lâm sàng đ ứng dụng thành công công nghệ bảo quản lạnh tế bào gốc từ tủy xương, tế bào gốc trung mô hay