tailieunhanh - Định lượng doxorubicin trong huyết tương chuột bằng sắc ký lỏng hiệu năng cao

Mục tiêu nghiên cứu của bài viết nhằm xây dựng và thẩm định phương pháp định lượng doxorubicin (DOX) trong huyết tương chuột, ứng dụng trong đánh giá sinh khả dụng, tương đương sinh học của các chế phẩm chứa DOX trên thực nghiệm. | T¹p chÝ y - d−îc häc qu©n sù sè 6-2017 ĐỊNH LƯỢNG DOXORUBICIN TRONG HUYẾT TƯƠNG CHUỘT BẰNG SẮC KÝ LỎNG HIỆU NĂNG CAO Bùi Bá Minh* TÓM TẮT Mục tiêu: xây dựng và thẩm định phương pháp định lượng doxorubicin (DOX) trong huyết tương chuột, ứng dụng trong đánh giá sinh khả dụng, tương đương sinh học của các chế phẩm chứa DOX trên thực nghiệm. Phương pháp: xây dựng và thẩm định phương pháp định lượng DOX trong huyết tương chuột bằng sắc ký lỏng hiệu năng cao (HPLC) theo hướng dẫn của FDA. Kết quả: đã xây dựng được quy trình định lượng DOX bằng HPLC với các điều kiện sau: xử lý mẫu bằng tủa protein với acetonitril; cột Gemini C18; 5 µm, 250 x 4 mm; pha động: acetonitril - amoni nitrat 0,25 g/l trong nước với tỷ lệ 30:70 (v/v); tốc độ dòng 1,0 ml/phút; detector: PDA ở 232 nm; thể tích tiêm mẫu: 10 µl; thời gian chạy: 10 phút; nội chuẩn là daunorubicin 8 µg/l. Phương pháp có độ đặc hiệu, chọn lọc tốt, thời gian lưu của DOX trung bình 3,5 phút, tách biệt hơn daunorubicin với thời gian lưu trung bình 5,7 phút. Mẫu trắng có đáp ứng nhỏ hơn 5% so với mẫu chuẩn và nội chuẩn. Độ lặp lại tốt với độ lệch chuẩn tương đối (RSD) trong ngày từ 2,1 - 3,8 % và khác ngày từ 3,62 - 4,68%. Độ đúng đạt 91,7 - 98,4% với 2 khoảng nồng độ từ 1 - 100 µg/l. Độ tuyến tính từ 1 - 100 µg/l với R là 0,9995. Giới hạn định lượng dưới 1 µg/l. Phương pháp xử lý mẫu có hiệu suất chiết cao (94,2 - 98,8%) với RSD < 4%. Mẫu huyết tương ổn định sau 3 chu kỳ đông - rã và trong quá trình xử lý mẫu. Kết luận: quy trình có thể áp dụng được để định lượng DOX trong huyết tương chuột. * Từ khóa: Doxorubicin; Huyết tương chuột; Sắc ký lỏng hiệu năng cao. Determination of DOX Concentration in Mouse Plasma by High Performance Liquid Chromatography Summary Objectives: To develop and validate the method of DOX determination in mouse plasma to assess the bioavailability, the biological equivalence of the DOX-containing compositions. Methods: Development and validation a method of quantifying DOX in mouse plasma by .