tailieunhanh - Nghiên cứu tạo baculovirus tái tổ hợp biểu hiện hemagglutinin (ha) của virus cúm A/H5N1 Clade 2.3.2.1b

Bài viết nghiên cứu tạo baculovirus tái tổ hợp biểu hiện kháng nguyên bề mặt Hemagglutinin (HA) từ chủng virus cúm A/H5N1 clade phân lập tại Quảng Ngãi (DkQN37/11), chủng virus kháng lại vaccine cúm NIBRG14 (clade 1) hiện đang được sử dụng tại Việt Nam. | TAP Nghiên CHI SINH 2015, 37(1): cứuHOC tạo baculovirus tái103-109 tổ hợp DOI: NGHIÊN CỨU TẠO BACULOVIRUS TÁI TỔ HỢP BIỂU HIỆN HEMAGGLUTININ (HA) CỦA VIRUS CÚM A/H5N1 Clade Nguyễn Thị Hoa, Đồng Văn Quyền* Viện Công nghệ sinh học, Viện Hàn lâm KH & CN Việt Nam, *dvquyen@ TÓM TẮT: Hiện nay, cúm gia cầm A/H5N1 vẫn là mối đe dọa đối với sức khỏe cộng đồng, đặc biệt sự xuất hiện của các clade mới thời gian gần đây với tính độc lực cao hơn, có khả năng kháng lại các vaccine được phát triển từ các clade lưu hành trước đó. Với mục đích tạo vaccine phòng cúm A/H5N1 bằng công nghệ tạo hạt giả virus (virus-like particles, VLPs), trong nghiên cứu này chúng tôi tạo baculovirus tái tổ hợp biểu hiện kháng nguyên bề mặt Hemagglutinin (HA) từ chủng virus cúm A/H5N1 clade phân lập tại Quảng Ngãi (DkQN37/11), chủng virus kháng lại vaccine cúm NIBRG14 (clade 1) hiện đang được sử dụng tại Việt Nam. Gene mã hóa HA được khuếch đại bằng PCR với cặp mồi đặc hiệu có gắn thêm trình tự Kozak, mã khởi đầu và vị trí nhận biết BamHI ở đầu 5’ của mồi xuôi và trình tự nhận biết của HindIII ở đầu 5’ của mồi ngược. Sản phẩm PCR được tách dòng vào vector pCR® và xác định trình tự, sau đó được gắn vào vector trung gian baculovirus (Invitrogen) tại vị trí BamHI và HindIII, nằm xen giữa gene lacZ và ORF1629 tạo plasmid tái tổ hợp pBluBacHA. Vector pBluBacHA sau đó được đồng chuyển nạp cùng với DNA của baculovirus vào tế bào loài sâu khoang, Spodoptera frugiperda (Sf9) để tạo baculovirus tái tổ hợp. Sự có mặt của gene ha và sự biểu hiện của protein HA trong virus tái tổ hợp được kiểm tra bằng PCR và Western blot sử dụng kháng thể kháng HA. Kết quả PCR và Western blot đều kháng định chúng tôi đã tạo thành công baculovirus tái tổ hợp biểu hiện kháng nguyên bề mặt của virus cúm A/H5N1 clade . Đây là tiền đề quan trọng cho các nghiên cứu tiếp theo nhằm phát triển vaccine VLP cúm A/H5N1 ở Việt Nam. Từ khóa: .

TỪ KHÓA LIÊN QUAN
crossorigin="anonymous">
Đã phát hiện trình chặn quảng cáo AdBlock
Trang web này phụ thuộc vào doanh thu từ số lần hiển thị quảng cáo để tồn tại. Vui lòng tắt trình chặn quảng cáo của bạn hoặc tạm dừng tính năng chặn quảng cáo cho trang web này.