tailieunhanh - Sự biểu hiện gene đa tiềm năng ở mức phiên mã trong tế bào gốc phôi bò

Bài viết này nghiên cứu về phân lập và nuôi cấy tế bào gốc từ phôi bò giai đoạn phôi nang. Tế bào gốc phôi bò được nuôi cấy trên lớp tế bào nuôi dưỡng là nguyên bào sợi phôi chuột bị bất hoạt bởi mitomycin C. Phương pháp real-time qRT-PCR được sử dụng để đánh giá sự biểu hiện của các gene đa tiềm năng của tế bào gốc phôi bò. | TAP CHI SINH HOCnăng 2015,ở 37(1): 110-116 Sự biểu hiện gene đa tiềm mức phiên mã DOI: SỰ BIỂU HIỆN GENE ĐA TIỀM NĂNG Ở MỨC PHIÊN MÃ TRONG TẾ BÀO GỐC PHÔI BÒ Lê Thành Long1*, Nguyễn Thị Phương Thảo1, Đoàn Chính Chung2, Đỗ Minh Sĩ2, Lê Hữu Trình3, Hoàng Nghĩa Sơn1 1 Viện Sinh học Nhiệt đới, Viện Hàn lâm KH & CN Việt Nam, *lelong2510@ 2 Trường Đại học Khoa học tự nhiên, tp. Hồ Chí Minh 3 Đại học Y Dược, tp. Hồ Chí Minh TÓM TẮT: Trong nghiên cứu này, chúng tôi phân lập và nuôi cấy tế bào gốc từ phôi bò giai đoạn phôi nang. Tế bào gốc phôi bò được nuôi cấy trên lớp tế bào nuôi dưỡng là nguyên bào sợi phôi chuột bị bất hoạt bởi mitomycin C. Phương pháp real-time qRT-PCR được sử dụng để đánh giá sự biểu hiện của các gene đa tiềm năng của tế bào gốc phôi bò. Các quần thể tế bào gốc phôi bò dương tính với alkaline phosphatase, tuy nhiên, sự biểu hiện của alkaline phosphatase giảm trong lần cấy chuyền thứ ba. Kết quả phân tích định lượng bằng phương pháp 2-∆∆Ct cho thấy, sự biểu hiện của gene oct4 ở lần thứ ba cấy chuyền cao hơn lần thứ nhất và lần thứ hai. Sự biểu hiện của gene nanog và sox-2 giảm trong quá trình cấy chuyền tế bào gốc phôi bò, trong đó sự biểu hiện của sox-2 giảm mạnh ở lần cấy chuyền thứ ba, thấp hơn 10 lần so với lần cấy chuyền thứ nhất. Sự biểu hiện của gene c-myc tăng ở lần cấy chuyền thứ ba. Những thay đổi trong sự biểu hiện các gene trên tương ứng với những thay đổi về mặt hình thái trong quá trình cấy chuyền. Quần thể tế bào gốc phôi biểu hiện những đặc điểm của sự biệt hóa khi các gene nanog và sox-2 giảm sự biểu hiện và gene oct4 và c-myc tăng sự biểu hiện hơn mức bình thường. Từ khóa: Biểu hiện gene, gene đa tiềm năng, phôi bất hoạt, tế bào gốc phôi bò. MỞ ĐẦU Các dòng tế bào gốc phôi đã được phân lập thành công từ phôi nang của chuột, khỉ và người, ngoài ra, việc thu nhận còn có thể được thực hiện từ phôi ở giai đoạn trước khi liên kết chặt với nhau (compact) [5, 12]. Hầu hết những cố gắng phân lập và .