tailieunhanh - Sự hiện diện và biểu hiện của gen Ds-Red ở Protocorm like body chuyển gen của phong lan Dendrobium cv. Burana White
Bài viết trình bày một số kết quả về nghiên cứu chuyển gen DsRed trước hết với tính chất là gen chỉ thị và hy vọng sản phẩm protein của gen này có thể sẽ tạo thay đổi ít nhiều màu sắc hoa của đối tượng phong lan thí nghiệm Dendrobium, từ trắng sang hồng. | TẠP CHÍ SINH HỌC, 2012, 34(3SE): 212-218 SỰ HIỆN DIỆN VÀ BIỂU HIỆN CỦA GEN Ds-Red Ở PROTOCORM-LIKE BODY CHUYỂN GEN CỦA PHONG LAN Dendrobium CV. BURANA WHITE Nguyễn Hữu Hổ1*, Huỳnh Nguyên Phát2, Lê Tấn Đức1, Trần Thị Ngọc Hà1, Nguyễn Hữu Tâm1,3 (1) Viện Sinh học Nhiệt đới, Viện Khoa học và Công nghệ Việt Nam, (*)nguyenhuuho@ (2) Đại học Khoa học tự nhiên, tp Hồ Chí Minh (3) Đại học Nebraska-Lincohn, Nebraska, Hoa Kỳ TÓM TẮT: Bốn dòng protocorm-like body (PLB) phong lan Dendrobium cv. Burana White mang gen mục tiêu Ds-Red tạo biểu hiện phát sáng đỏ đã được chọn tạo qua biến nạp bằng phương pháp bắn gen. PLB (để tối khoảng 3 tháng, có màu trắng), qua cắt nhỏ thành các cụm có kích thước 3-5 mm, được sử dụng như mô đích để bắn. Vi hạt vàng (0,9 m), bao bởi hỗn hợp plasmid (tỷ số Mol 3:1, theo thứ tự) giữa plasmid pITB-DsRED mang gen Ds-Red tạo phát sáng đỏ với plasmid pITB-BAR mang gen bar tạo tính kháng chất diệt cỏ phosphinothricin (PPT), được bắn vào PLB bằng hệ thống BIO-RAD PDS-1000/He. Sau bắn gen 2 ngày, PLB được cấy chuyển qua nhiều chu kỳ chọn lọc trên môi trường Knudson C (với 1 mg/l BA) có chứa 1-3 mg/l PPT. Sự biểu hiện tạm thời của gen DsRed ở PLB (2 ngày sau bắn gen) đã được kiểm tra với kết quả dương tính. Sự hiện diện của các gen DsRed, bar đã được kiểm tra bằng kỹ thuật PCR với kết quả có sự hiện diện của các băng DNA tương ứng 350 bp và 500 bp. Biểu hiện phát sáng đỏ bền vững đã được kiểm tra, ghi nhận bằng mắt thường dưới ánh sáng tự nhiên/ánh sáng trắng và ghi nhận dưới ánh sáng vàng-xanh lục (yellow-green) (bước sóng khoảng 560 nm) qua quan sát PLB dưới kính hiển vi soi nổi gắn kính lọc đỏ. Kết quả nghiên cứu này cho thấy protein DsRed là một chỉ thị thích hợp trong nghiên cứu biến nạp di truyền ở lan Dendrobium và hệ thống này có thể được sử dụng trong nghiên cứu cơ bản đặc biệt trong nghiên cứu thay đổi màu sắc hoa do sản phẩm của gen chuyển. Đây là kết quả nghiên cứu đầu tiên về biến nạp gen DsRed được thực hiện thành công trên lan .
đang nạp các trang xem trước
