tailieunhanh - Khảo sát hiệu ứng gây tử vong của Azadirachtin lên tế bào ấu trùng ngài gạo nuôi cấy in vitro

Nội dung bài viết này liên quan đến việc lần đầu tiên xây dựng được quy trình nuôi cấy tế bào ngài gạo in vitro và khảo sát hoạt tính gây chết của azadirachtin ở nồng độ 5 µM lên tế bào ấu trùng ngài gạo nuôi cấy in vitro. | Tạp chí Công nghệ Sinh học 8(1): 37-43, 2010 KHẢO SÁT HIỆU ỨNG GÂY TỬ VONG CỦA AZADIRACHTIN LÊN TẾ BÀO ẤU TRÙNG NGÀI GẠO (CORCYRA CEPHALONICA ST.) NUÔI CẤY IN VITRO Lê Thị Thanh Phượng1, Nguyễn Tiến Thắng1, Bùi Cách Tuyến2, Nguyễn Ngọc Như Băng3, Phan Lê Khoa3, Phan Kim Ngọc3 1 Viện Sinh học nhiệt ñới Trường ðại học Nông Lâm thành phố Hồ Chí Minh 3 Trường ðại học Khoa học tự nhiên, ðại học Quốc gia thành phố Hồ Chí Minh 2 TÓM TẮT Việc lạm dụng thuốc trừ sâu tổng hợp ñã dẫn ñến những hậu quả nghiêm trọng như sự kháng thuốc, bùng nổ dịch bệnh và nhiều tác hại khác ñối với thiên ñịch và môi trường, từ ñó ñã thúc ñẩy nhu cầu nghiên cứu thuốc trừ sâu thiên nhiên với hiệu quả phòng trị và ñộ an toàn sinh học cao. Vì vậy, việc sử dụng hoạt chất sinh học gốc thảo mộc từ lâu ñã ñược khuyến cáo ở nhiều nước. Trong ñó, cây neem (Azadirachta indica A. Juss) ñược xem là một trong những ứng cử viên tiềm năng. Hơn 120 hoạt chất sinh học ñã ñược phát hiện từ cây neem; trong ñó, tiêu biểu nhất là azadirachtin, hiện diện chủ yếu ở nhân hạt. Azadirachtin ñược báo cáo là có tác ñộng ñến côn trùng qua nhiều phương thức như gây ngán ăn, xua ñuổi, gây chết, ức chế sinh trưởng và sinh sản. Tuy nhiên, vẫn còn rất ít nghiên cứu về tác ñộng của azadirachtin lên côn trùng ở mức ñộ tế bào. ðặc biệt, chưa có công bố nào về tác ñộng của azadirachtin lên tế bào ngài gạo (Corcyra cephalonica), một loài côn trùng hại kho rất phổ biến ở nhiều nước. Nghiên cứu này lần ñầu tiên báo cáo quy trình nuôi cấy tế bào ngài gạo và tác ñộng của azadirachtin ñối với chúng. Tế bào thu từ ấu trùng ngài gạo giai ñoạn 3 - 5 ngày tuổi ñược nuôi cấy tăng sinh trong môi trường Grace chứa 10% huyết thanh. Sau một thời gian nuôi cấy nhằm ñạt số lượng thích hợp, tế bào ngài gạo ñược cấy vào ñĩa 96 giếng ñể khảo sát ñường cong tăng trưởng và xác ñịnh pha lũy thừa của tế bào. Tác ñộng gây chết tế bào ngài gạo của azadirachtin ñược khảo sát bằng phương pháp sử dụng thuốc nhuộm trypan blue. Kết quả bước ñầu cho thấy .