tailieunhanh - Thử hoạt tính kháng thể tái tổ hợp đặc hiệu vi khuẩn Escherichia coli O157:H7

Trong bài viết này, protein kháng thể tái tổ hợp đặc hiệu vi khuẩn E. coli O157:H7 được tinh sạch bằng phương pháp hybrid. Tiếp theo, Hoạt tính kháng thể được thử bằng các phương pháp như Dot Blot, Western Blot và ELISA. | TAP CHI SINH HOC 2014, 36(3): 340-344 Hoạt tính thể tái tổ hợp đặc hiệu DOI:kháng THỬ HOẠT TÍNH KHÁNG THỂ TÁI TỔ HỢP ĐẶC HIỆU VI KHUẨN Escherichia coli O157:H7 Hoàng Phú Hiệp1, Lê Thị Kim Xuân2, Nguyễn Minh Lụa2, Nguyễn Thị Minh Huyền2, Trần Mạnh Hà2, Đào Minh Đức2, Nguyễn Bích Nhi2, Lê Quang Huấn2 Trường Đại học Sư phạm Thái Nguyên, Đại học Thái Nguyên Viện Công nghệ sinh học, Viện Hàn lâm KH & CN Việt Nam, *huanlequang@ 1 2 TÓM TẮT: Kháng thể là các phân tử immunoglobulin có bản chất là glycoprotein đóng vai trò nhận biết và vô hiệu hóa các tác nhân lạ như virus hoặc vi khuẩn. Trong nghiên cứu này, protein kháng thể tái tổ hợp đặc hiệu vi khuẩn E. coli O157:H7 được tinh sạch bằng phương pháp hybrid. Tiếp theo, Hoạt tính kháng thể được thử bằng các phương pháp như Dot Blot, Western Blot và ELISA. Kết quả cho thấy protein kháng thể bắt cặp đặc hiệu với vi khuẩn E. coli O157:H7. Bước đầu xác định tính đặc hiệu kháng thể tái tổ hợp bằng phương pháp gắn hạt nano silica với kháng thể và nhuộm với vi khuẩn E. coli O157:H7 và soi dưới kính hiển vi. Từ đó tạo cơ sở khoa học cho việc nghiên cứu tạo kit chuẩn đoán vi khuẩn này trong mẫu thực phẩm cũng như cung cấp thêm nguồn kháng thể trong phác đồ điều trị ngộ độc do vi khuẩn E. coli O157:H7 gây ra. Từ khóa: Escherichia coli O157:H7, pET28a TRX, kháng thể tái tổ hợp, nano silica. MỞ ĐẦU Escherichia coli O157:H7 là một trong bốn chủng vi khuẩn gây bệnh tiêu chảy sau các chủng Campylobacter sp., Salmonella sp. và Shigella sp. Các bệnh có liên quan đến vi khuẩn E. coli là bệnh tiêu chảy, viêm phổi, viêm đường nước tiểu và một số bệnh khác. Triệu chứng bị nhiễm trùng vi khuẩn thường khác nhau, nhưng nhìn chung, bệnh nhân có các triệu chứng như: nôn, đau bụng, sốt, xuất huyết da, cao huyết áp, tiêu chảy thường có máu [1]. Hàng năm, vi khuẩn E. coli O157:H7 gây ra nhiều vụ ngộ độc trên thế giới. Tháng 6 năm 2009 Trung tâm Kiểm soát và phòng chống Bệnh của Hoa Kỳ (CDC) đã thông báo có .