tailieunhanh - Báo cáo " Biểu hiện kháng nguyên CD25 tái tổ hợp trong vi khuẩn E. Coli "

Biểu hiện kháng nguyên CD25 tái tổ hợp trong vi khuẩn E. Coli | Tạp chỉ Công nghệ Sinh học 7 3 319-324 2009 BIÊU HIỆN KHÁNG NGUYÊN CD25 TÁI TÔ HỢP TRONG VI KHUẨN E. COLI Lã Thị Huyền Nguyễn Phương Hoa Đặng Thị Thu Lê Quang Huấn Viện Công nghệ sinh học TÓM TẮT CD25 hay IL-2Ra tiểu phần a của thụ thể IL-2 xuất hiện với nồng độ cao ưên bề mặt các tế bào ung thư máu ung thư dạng Hogdkin ung thư dòng tùy mạn tính ung thư tế bào tua ung thư tế bào T người trường thành . các tế bào T gây bệnh bệnh tự miễn và bệnh nhân ghép tạng CD25 là đích để tiêu diệt các tế bào gây bệnh và tế bào bệnh lý. Đặc biệt hơn CD25 còn tồn tại ở dạng tự do với hàm lượng cao trong huyết thanh cùa các bệnh nhân này như một marker cho việc chẩn đoán và tiên lượng bệnh. Nghiên cứu này thực hiện nhằm thu được lượng lớn CD25 của người tái tồ hợp. Do vậy chúng tôi tiến hành PCR nhân bản đoạn gen mã hóa cho phần ngoại bào cùa CD25 tách dòng xác định trình tự. Vector biểu hiện pET-22b CD25 được thiết kế và biểu hiện thành công thu protein CD25 tái tố hợp ở chùng biểu hiện BL21 DE3 với điều kiện nuôi cấy frong môi trường LB ờ 30 C khi OD600 đạt 0 8 các tế bào được cảm ứng với IPTG nồng độ cuối cùng 1 mM và thu mẫu sau 5 h cảm ứng. Mầu protein CD25 được tinh sạch nhờ cột sắc kí Ni-resin và xác định cấu trúc bậc nhất bằng kĩ thuật khối phổ. Kết quả thu được khẳng định chắc chan rằng chúng tôi đã thu nhận được protein CD25 tinh sạch bằng công nghệ gen đảm bảo cho các nghiên cứu xa hơn. Từ khóa CD25 E. coli pET-22b tái tể hợp ung thư máu ĐẶT VẤN ĐỀ CD25 là tiểu phần a trong hệ thụ thể của Interleukin-2 IL-2 . Ở người gen mã hóa cho phân tử này nằm trên nhiễm sắc thể số 10 tại vị trí 1 Op 15-pl4. Protein CD25 mới được tổng hợp có 272 amino acid aa bao gồm phần tín hiệu tiết 21 aa và 251 aa còn lại thuộc phân tử protein trường thành. Ba phần của thụ thể a là phần ngoài màng trong màng và trong tế bao gồm 219 19 và 13 aa tương ứng Waldmann 1991 Murakami 2004 . Các tiểu phần y và p tham gia cấu trúc nên nhiều thụ thể của các interleukin khác riêng tiểu phần a CD25 chỉ tham .