tailieunhanh - Báo cáo " Cây thuốc lá chuyển gen mang cấu trúc RNAi kháng đồng thời hai loại virus gây bệnh khảm "

Cây thuốc lá chuyển gen mang cấu trúc RNAi kháng đồng thời hai loại virus gây bệnh khảm | Tạp chỉ Công nghệ Sinh học 7 2 193-201 2009 CÂY THUỐC LÁ CHUYỂN GEN MANG CẤU TRÚC RNAi KHÁNG ĐÒNG THỜI HAI LOẠI VIRUS GÂY BỆNH KHẢM Phạm Thị Vân Chu Hoàng Hà Lê Trần Bình Viện Công nghệ sinh học TÓM TẮT Bệnh khảm do virus tobacco mosaic virus TMV và cucumber mosaic virus CMV gây ra là một trong những tác nhân gây bệnh nghiêm trọng làm giảm năng suất và chất lượng cho nhiều loài cây trồng như cà chua khoai tây thuốc lá cây tiêu. Đe tạo ra cây thuốc lá kháng đồng thời hai virus tobacco mosaic virus TMV và cucumber mosaic virus CMV băng kỹ thuật RNAi RNA interference một đoạn gen CP đa đoạn-CPi 305 bp từ vị trí nucleotide 159 - 463 gen CP TMV 313 bp từ vị tri nucleotide 315 - 627 gen CP CMV đã được chọn cho thiết ke vector chuyển gen mang cấu trúc ihpRNA intron hairpin RNA ihpRNA . cấu trúc nây đã được chuyển vào cây thuốc lá Nicotiana tabacum giống K326 thông qua vi khuẩn Agrobacterium tumefaciens. Ket quả phân tích PCR RT-PCR và ELISA đã chứng minh đoạn gen đa đoạn CPi đã được chuyển vào genome thuốc lá và dẫn tới sự vắng mặt của TMV và CMV trong các dòng thuốc lá chuyển gen. Kết quả đánh giá sau ba lần lây nhiễm nhân tạo cùng lúc với TMV và CMV cho thấy tỷ lệ các dòng chuyển gen TO kháng hoàn toàn trên tổng số các dòng kiểm tra là 34 48 70 8 . Từ khóa Cây chuyển gen cây thuốc lá Nicotiana tabacum RNAi RNA interference virus khảm dưa chuột CMV tobacco mosaic virus TMV MỞ ĐẦU Bệnh khảm do virus tobacco mosaic virus TMV và cucumber mosaic virus CMV gây ra là một hong những tác nhân gây bệnh nghiêm trọng làm giảm năng suất và chất lượng cho ít nhất 199 loài trong 35 họ TMV Shew Lucas 1991 và hơn 800 loài trong 85 họ CMV Falk Hull 2004 thực vật khác nhau trong đó thuốc lá là một trong những đối tượng chịu thiệt hại lớn nhất có thể lên tới 100 Nguyễn Văn Chín Nguyễn Ngọc Bích 2008 . Vì vậy việc nghiên cứu tạo cây trồng có khả năng kháng đồng thời TMV và CMV sẽ có ý nghĩa ứng dụng lớn đối với sản xuất nông nghiệp của Việt Nam. Kỹ thuật di truyền là một công cụ quan trọng