tailieunhanh - Báo cáo " Nuôi cây bao phấn tạo dòng thuần ở giống lúa nếp đặc sản Tú Lệ "

Nuôi cây bao phấn tạo dòng thuần ở giống lúa nếp đặc sản Tú Lệ | Tạp chí Công nghệ Sinh học 7 1 53-58 2009 NGHIEN cútĩ PHÂN LẬP CÁC YẾU TỐ ĐIỀU KHIỂN BIỂU HIỆN GEN ĐẬC HIỆU TỪ BÈO TẤM SPIRODELA POLYRRHIZA DB2 Trần Thị Phương Liên1 Hà Hồng Hạnh1 Lê Huy Hàm2 Viện Công nghệ sinh học Viện Khoa học và Công nghệ Việt Nam 2Viện Di truyên nông nghiệp Viện Khoa học nông nghiệp Việt Nam TÓM TẮT Nghiên cứu phân lập và sử dụng các đoạn điều khiển biểu hiện gen đặc hiệu từ cây trồng là hướng nghiên cứu được đặc biệt chú ý đên trong công nghệ gen thực vật nhằm năng cao khà năng biểu hiện các gen tái tổ hợp. Bèo tâm là thực vật một là mầm đối tượng nghiên cứu tương đối mới có hàm lượng protein và polysaccharide cao vì vậy việc hoàn thiện quy trinh tách chiết DNA được tiến hành sử dụng một số phương pháp khác nhau với một số cài tiến nhò. Kết quả cho thấy các phương pháp sử dụng kết hợp CTAB và PVP CTAB và PEG hoặc SDS và PVP có sản phẩm DNA sạch và chất lượng tốt. Đoạn các yếu tố điều khiển biểu hiện bao gôm promoter 5 UTR unfranslated region và intron 1 cùa gen mã hóa cho ubiquitin SpUBipin được nhân lên bang PCR sử dụng DNA genome cùa giống bèo tấm Spirodela polyrrhiza DB2. Sản phẩm PCR được tách dòng vào vector pJETl .2 kiểm tra bằng các enzyme cắt hạn chế và đọc trinh tự. Như vậy đoạn các yếu tố điều khiển biểu hiện bao gồm promoter 5 UTR và intron 1 có độ dài 2013 bp còn đoạn promoter và 5 UTR có độ dài 1033. Phân lập cả 2 đoạn đoạn promoter và đoạn bao gồm cả promoter và intron 1 nhằm mục đích nghiên cứu ảnh hưởng của intron 1 đến khả năng biểu hiện gen. So với trình tự này của giống đã được công bố vùng promoter có 4 vị trí thay đổi vùng intron 1 có 2 vị tri thay đổi. Khà năng sừ dụng các đoạn promoter này để biểu hiện các gen trong bèo tấm như thế nào là vấn đề cần nghiên cứu tiếp. Từ khóa Bèo tấm Spirodela polyrrhiza biếu hiện gen intron promoter ubiquitin MỞ ĐẦU Promoter là thành phần quan trọng trong cấu trúc của tất cả các gen khởi đầu cho sự phiên mã đóng vai trò then chốt trong việc biểu hiện gen. Trong công nghệ gen thực vật vấn